药 临床上。 ａ喇ｃ 注射用赖氨匹林的两种含量测定方法 陈丽，刘放 ，孙滢婕。 １浙江大学医学院附属第～医院．杭州３１０００３．２浙江省医学科学院药物研究所．杭ｅｌ，ｆ ３１００１ ３ ３宁波医药高等专科学校， 宁波３１ ５１０Ｏ 摘要：目的：采用高效液相色谱法和紫外分光光度法同时测定注射用赖氨匹林的含量．为质量控制提供有效的分析手段。方 法：高效液相色谱法：ＨｙｐｅｒｓｉＩ Ｃ１ ８（１ ５０ｍｍ Ｘ ４ ６ｒａｍ １Ｏｇｍ） 以甲醇一０ １％三乙胺溶液（１ ，冰醋酸调节ＤＨ至３ ５）为流 动相．检测波长为２８０ｎｍ 按外标法以峰面积计算。紫外分光光度法检测波长２１Ｏｎｍ。结果：高效液相色谱法：阿司匹林和 水杨酸在６０ ３４Ｎ ９０５ １Ｏｇｇ／ｍｌ和１ ２Ｏ～１ ８ ００￣ｇ／ｍｌ浓度范围内呈良好的线性关系．其线性相关系数分别为０ ９９９９和０ ９９９９： 加样回收率分别为９８ ７６％～９９ ２９％（ＲＳＤ＝０ ５ｇ％～０ ９３％）和９８．４９％～９ｇ ６９％（ＲＳＤ＝Ｏ ８０％～１．Ｏ１％）。紫外分光光度法 赖氨匹林浓度在４ Ｏ～１４ Ｏ＃ｇ／ｍｆ范围内与吸收度有良好的线性关系，回归方程为：Ｙ＝Ｏ ０５４８Ｘ一０ ０２９９ ｒ＝Ｏ．９９９８，方法平均 回收率为９９ ８％～１００ ７％，ＲＳＤ为１ ６２％～１ ８１％。结论：两种方法均可用作注射用赖氨匹林的质量控制。 关键词：赖氨匹林 阿司匹林；水杨酸；注射用赖氨匹林；高效液相色谱法；紫外分光光度法 ［中图分类号］Ｒ９６９ １ 【文献标识码］Ａ ［文章编号］１ ６７２—２８０９（２０１ １）１ Ｏ－００３２－０５ Ｃ‘Ｉ劬ｍｔ Ｄ｜炯脚曲撕０虹ｏｆｌｙｓ￣ＣＨＥＮ Ｌｉ ，ＬＩＵ Ｆａｎｇ ，ＳＵＮ Ｙｉｎｇ－ｊｉｅ ｆｏｒ 池ｂｙ删ＣａｎｄＵＶｓｐｅｃ １．Ｔｈｅ Ｆｉｓｔ Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ Ｃｈｉｎａ，３１０００３；２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｍａｔｅｉｒａ Ｍｅｄｉｃａ，ＺｈｅｊｉａｎｇＡｃａｄｅｍｙ ｏｆＭｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｎｇｚｈｏ Ｃｈｉｎａ，３１００１３；３．ＺｈｅｊｉａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｎｉｎｇｂｏ，Ｃｈｉｎａ ３１５１００ Ａｂｅ．ａｃｔ：Ｏｂｊｅ￣ｉｖｅ：Ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｍｉｒｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ ｉｎ ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ ｃａｐｓｕｌｅｓ ｂｙ ＨＰＬＣ ａｎｄ ＵＶ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｒｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｃｏｌｏｍｍ ｗａｓ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ Ｃ１８（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ．１Ｏｒｔｍ）．ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｅ一０．１％ ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１：１，ｕｓｅ ａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｇｌａｃｉａｌ ｐＨ３．５），ａｎｄ ａ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ２８０ｎｍ，ｅｘｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｍｅｔｈｏｄ．ＵＶ－ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒ ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ２８０ｎｍ．Ｒ眵ｕｌ乜：ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅｓ ｈａｄ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ６０．３４～９０５．１０ｇｇ／ｍｌ ａｎｄ １．２０～１８．ＯＯｇｇ／ｍ１．ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｉｃｉｆｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ０．９９９９ ａｎｄ ０．９９９９ ｆｏｒ ａｓｐｉｒｉｎ ａｎｄ ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｉｃｄ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ａｓｐｉｉｒｎ ａｎｄ ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ ａｄｄｅｄ ｗｅｒｅ ９８．９７％～９９．２９％（ＲＳＤ＝０．５９％～Ｏ．９３％１ ａｎｄ ９８．４９％～９９．６９％（ＲＳＤ＝０．８０％～１．０ｌ％、．ＵＶ－ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｍｅｈｔｏｄｓ：Ｔｈｅｒｅｗａｓ ａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｏｖｅｒｔｈｅ ｒａｎｇｅｏｆ４．０～１４．０ｇｇｍ１．ｈｅＴ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｉｓ Ｙ＝０．０５４８Ｘ・０．０２９９，ｒ＝０．９９９８．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．８％～１ ００．７％ｗｉｔｈ ＲＳＤ ｏｆ １．６２％～１．８ １％．Ｃｏｎｃｌｍｉｏｍ： Ｔｈｅ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｓｉｍｐｌｅ，ｒｅｐｉｄ，ａｃｃｕｒａａｔｅ ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｓ ｌｙｓｉｎｉｐｉｒｉｎｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｙｓｉｎｉｐｉｒｉｎｅ；Ａｓｐｉｒｉｎ；Ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ；Ｌｙｓｉｎｉｐｉｒｉｎｅ ｏｒｆ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ；ＵＶ－ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒ 射用赖氨匹林为阿司匹林与赖氨酸的复 卫生部药品标准 中采用溴量法及非水滴定法测定 １＿＿Ｊ一盐，较阿司匹林有更好的疗效，是一种 赖氨匹林中乙酰水杨酸和赖氨酸的含量，其粉针剂 解热镇痛药，其特点是适于肌注或静注，起效快， 则采用非水滴定法测定赖氨酸来计算赖氨匹林的含 血浓度高，作用时间长，毒副作用小。临床上用于 量。国家药品标准 ｌ‘‘赖氨匹林散”也采用非水滴 多种原因引起的发热和疼痛，在肌肉注射和静脉注 定法测定赖氨酸盐，并不测定水杨酸的含量。也有 射等非胃肠道给药时，避免了阿司匹林严重的胃肠 采用高效液相色谱法测定赖氨匹林含量 ｌ。作者参 道副作用，可用于各种原因引起的发热与疼痛。 考有关文献 。Ｊ，采用高效液相色谱法和紫外分光光 度法测定注射用赖氨匹林的含量，获得了满意的结 作者简介： 陈丽，女，药师，主要从事医院药学 工作。电话：０８７１－－８７２３６６７５；Ｅ－－ｍａｉｌ ：ｘｉａｏｎｆｕ１ ９８６０１ Ｏ５＠１ ２６．ｃｏｍ 果。 １仪器与试药 １．１仪器ＬＣ一１０Ａｔｖｐ高效液相色谱仪系统（日本岛 津）：包括ＬＣ一１０ＡＤ泵，ＳＰＤ—ｌＯＡ紫外－可见检测 器；Ｎ．２０００色谱工作站（浙江大学智达信息工程有 通讯作者： 刘放，男，主要从事医院药学工作。电 话：１ ３８５８１２５１ ８５；Ｅ－ｍａｉｌ：ｆａｎｇｌｉｕ５８５８＠ ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｃｎ ２Ｏｌ｜一１－３ 收稿日期： 接受日期：２Ｏ１ １－６－１ ５ 限公司）；Ｔｕ一１８００紫外一可见分光光度计（北京普析 ３２药品评价２０１１年第８卷第１ ２期 。ｍ ａ呲 ＩｌＩ药 临床 通用仪器有限责任公司）；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＢＳ１２４Ｓ电子天 ２．１．４精密度试验取同一阿司匹林对照品溶液（约 平（４Ｌ京赛多利斯股份有限公司），ＳＢ一２２００超声波清 ０．３ｍｇ／ｍ１）连续进样５次，测定峰面积的ＲＳＤ＝０．３ １％。 洗器（上海必能信超声有限公司）。 ２．１．５回收率试验称取注射用赖氨匹林约０．２ｇ，置 １．２试药阿司匹林对照品（中国药品生物制品检 １００ｍｌ量瓶中，加水杨酸对照品适量，用稀释剂制 定所，１０１１３－０１０１），水杨酸对照品（中国药品生物 成高浓度（１２ｏ％），中浓度（１００％）和低浓度（８０％）的 制品检定所，００６—９７０２），注射用赖氨匹林（批号： 溶液，精密量取２ｍｌ置１０ｍｌ量瓶中，加稀释剂至 ２００７１１０１，２００７１１０４，２００７１２０３，规格：０．９ｇ，吉林 刻度，摇匀；另称取注射用赖氨匹林约０．０４ ｇ，置 马应龙制药有限公司），甲醇（色谱醇，上海陆都化 １００ｍｌ量瓶中，加阿司匹林对照品适量，用稀释剂 学试剂厂），冰醋酸（ＡＲ，杭州化学试剂厂），三乙胺 制成高浓度（１２０％），中浓度（１００％）和低浓度（８０％） （ＡＲ，上海化学试剂采购供应站五联化工厂），枸橼 的溶液。取上述两种溶液，按上述色谱条件，分别 酸（ＡＲ，天津化学试剂厂），丙二醇（ＡＲ，江苏如嗥市 进样２０ｇｌ进行测定，结果见表１。 金陵化学试剂厂），氢氧化钠（ＡＲ，杭州萧山化学试 ２．１．６重复性试验取同一批号样品，制成６份供试 剂厂），硫酸（ＡＲ，衢州化学试剂有限公司）。 液，测定其中阿司匹林和水杨酸的含量，其ＲＳＤ分 别为０．８６％￣ｎｏ．９８％。 ２方法与结果 ２．１．７检测限按信噪比（Ｓ ）为３计算，阿司匹林的 ２．１高效液相色谱法 最低检测限为７．３ｎｇ，水杨酸为１．６ｎｇ。 ２．１．１色谱条件与系统适用性试验色谱柱：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ２．１．８样品测定精密称取样品适量（约相当于阿司匹 Ｃ１８（４．６ Ｘ ２５０ｍｍ，１０ｇｍ），流动相：甲醇一０．１％三乙胺溶 林３０ｍｇ），以稀释剂超声溶解并稀释至１００ｍｌ作为供 液（１：１，冰醋酸调节ｐＨ至３．５），检测波长：２８０ｎｍ，理 试品溶液，另取阿司匹林和水杨酸对照品适量同法 论板数按阿司匹林峰计算应不得低于３０００，阿司匹林 稀释，各进样２０／．ｔｌ，依法测定，记录色谱图，按外 峰与水杨酸的分离度应不得低于１．５。 标法以峰面积计算，结果见表２和图２。 ２．１．２阿司匹林紫外吸收光谱绘制精密称取阿司匹 ２．２紫外分光光度法 林对照品１２０ｍｇ，置１０ｍｌ量瓶中，３ｎｏ．３％枸橼酸 ２．２．１阿司匹林紫外吸收光谱取阿司匹林对照品 －５０％丙二醇溶液（稀释剂）超声溶解并稀释至刻度， 摇匀；精密量取适量，用上述溶剂稀释至约２０￣ｔｇ／ｍｌ 的溶液，以相应溶剂为参比，在波长２００～５００ｎｍ范 围内进行全扫描，绘制阿司匹林紫外吸收光谱，结 果阿司匹林在２８０ｎｍ处有最大吸收，见图１。 ２．１．３线性范围分别精密称取阿司匹林对照品 ｌ ５０ｍｇ，水杨酸对照品２．４ｍｇ，加０．３％枸橼酸 一５０％丙二醇溶液超声溶解并稀释至ｌ ００ｍｌ作为对 照品储备液，分别量取储备液０．５、１．０、１．５、 ２．５、５．０和７．５ｍｌ置于１０ｍｌ量瓶中，用上述溶剂稀 图１阿司匹林紫外吸收光谱 释至刻度，按前述色谱条件，分别进样２０ｇｌ进行 Ｆｉｇ ｌ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ａｓｐｉｒｉｎ 测定，记录色谱图，以组分浓度Ｃ（ｍｇ／ｍ１）对峰 面积Ａ进行线性回归，得标准曲线方程：阿司匹 ６０ｒａｇ，置１００ｍｌ量瓶中，用水溶解，并稀释至刻度， 林：Ａ＝１２４５．７１２Ｃ一２．５９５９，ｒ＝０．９９９９；水杨酸： 摇匀，精密吸取２ｍｌ，置２５ｍｌ量瓶中，加０．４％氢氧化 Ａ ｌ９７１．３４７Ｃ一０．０１５８，ｒ＝０．９９９９。结果表明：阿司匹 钠溶液５ｍｌ，水浴煮沸５ｍｉｎ，放冷，加稀硫酸２．５ｍｌ， 林浓度在６０．３４～９０５．１０ｇｇ／ｍｌ、水杨酸浓度在１．２０～ 再用水稀释至刻度，摇匀，以相应试剂空白为参 １ ８．００ｇｇ／ｍｌ范围内呈良好线性关系。 比，１ｃｍ比色皿，在２００－４００ｎｍ波长处进行扫描。 药品评价２０１１年第８卷第１ ２期３３ 。哗ａ ；ｃ ＩｌＩ药 临床 不同浓度溶液（分别相当于含量测定浓度的８０％、１００％ ￣Ｈ １２０％），每个浓度各平行操作３份，在波长３０２ｎｍ测 定吸收度。按标准曲线计算回收率。结果见表２。 ２．２．７样品含量测定取三个批号注射用赖氨匹林（规 格０．９ｇ）各１ ０瓶，混合后精密量取６０ｍｇ，置１ ００ｍｌ量瓶 中，用水稀释至刻度，摇匀；精密量取该溶液２ｍｌ溶 液￣１］２５ｍｌ量瓶中，加０．４％氢氧化钠溶液５ｍｌ，水浴煮沸 ５ｍｉｎ，放冷，加稀硫酸２．５ｍｌ，再用水稀释至刻度，摇 匀，作为供试品溶液。另取赖氨匹林对照品适量，同 法制成４８ ｇ／ｍｌ的溶液，作为对照品溶液。在波长３０２ｎｍ 处分别测定上述两种溶液的吸收度。按外标法以吸收 度计算注射用赖氨匹林标示百分含量，结果见表３。 ３讨论 ３．１赖氨匹林中乙酰水杨酸的测定在文献 中采用溴 量法。现基于赖氨匹林水解液在３０２ｎｍ处有最大吸 收，同时辅料在此无干扰，故可采用分光光度法测 定其制剂中乙酰水杨酸（阿司匹林）的含量。 ３．２本文采用两种方法测定注射用赖氨匹林的含 量，高效液相色谱法将赖氨匹林中的水杨酸与阿司 匹林分离，既可测定阿司匹林的含量又能检查游离 水杨酸，能比较准确地反映赖氨匹林的质量。该法 分离效果良好，重现性好，专属性强，结果准确。 可用于控制注射用赖氨匹林的质量。用紫外分光光 度法测定注射用赖氨匹林的含量，操作简便、快 速、专属性强，结果准确、可靠。同时，针对生产 表２回收率试验结果（力 ９） Ｔａｂ ２ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｓｔ（ｎ＝９） 图２对照品与供试品ＨＰＬＣ图谱 Ｆｉｇ ２ Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｔｅｓｔ ｐｒｏｄｕｃｔｓ 药品评价２０１１年第８卷第１ ２期３５ 药 临床上。忡 ｃ 表３样品含量测定结果（力＝３） Ｔａｂ ３ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ（ｎ＝３） 企业制剂车间从半成品到成品的时间要求，紫外分 光光度法更适合于制剂车间对注射用赖氨匹林半成 【２］ 国家食品药品监督管理局．国家药品标准ＷＳ１－（ｘ－０５７）一２００１Ｚ赖 氨匹林散［ｓ］ ［３］汤小斌，何林，余继英．ＨＰＬＣ法同时测定赖氨匹林散中阿司匹林和 游离水杨酸【Ｊ】．中国药师，２００４，７（１ １）：８７６－８７７ ［４］毛洁，李铜铃，，等ｌ赖氨匹林肠溶片的含量测定［Ｊ］．华西药学杂 志，２０００，１５（１）：１１９－１２０ 品的快速分析和质量控制，为基层单位进行赖氨匹 林及其制剂质量分析提供了一种参考分析方法。 ［５］郑国钢，方滢芝．高效液相色谱法测定赖氨匹林颗粒剂含量及其降 参考文献： ［１］中华人民共和国卫生部药品标准（二部）第四册，注射用赖氨匹林 ［ｓ］．１９９５；１０５－１０７ 解产物水杨酸的控制［Ｊ］．中国医院药学杂志，２０００，２０（１０）：６０９－６１０ ５．２安全合理使用注射剂的干预手段（下转第３ ６页） 使用不再有错误的认识；以及随着医务工作者对注 （上接第２７页） 射给药形式达到快速缓解症状和有效治疗疾病的目 的，在实际生活中他们常常也主动要求医师采取注 参考文献： 射剂安全合理使用意识的提高，临床注射给药情况 由于患者对于注射剂的认识不足，期望以注 将会更符合安全、有效、合理、经济的原则。 射给药，大多数医师都将注射剂在医疗机构中的过 度使用归咎于患者偏爱。２０世纪９０年代，印度尼西 亚的研究者们进行了一次随机对照试验 Ｊ，用以判 ［１］赵志刚，高海春，王爱国．注射剂的临床安全与合理应用［Ｍ］．北 京：化学工业出版社，２００８：１－４． ［２］Ｙｖａｎ Ｈｕｔｉｎ．全球在安全合理使用注射剂方面的最新进展［Ｊ］．中国 执业药师，２００８，５（１１）：４８－５０． 断通过让医师了解到大多数患者不偏好注射剂这一 干预措施能否改善他们的处方行为。这种互动式小 组讨论的干预模式，最大的特点就在于让患者和医 ［３］刘建平，合理静脉输液和其相关不良反应的原因分析［Ｊ］．中国临 床医师，２００６，３４（１０）：４５－４６． ［４］卫生部抗菌药物临床应用监测中心．卫生部抗菌药物临床应用监 测数据反馈．２０１０．５ 师进行心平气和的讨论。这种情况使得医师直接面 对那些包括小孩的妈妈在内的、不喜欢注射治疗的 患者。讨论之后，注射剂的处方量下降了，而且这 一【５］药品注射剂使用指南［Ｍ］．第１ ３版．上海：上海科学技术出版社， ２００５：ｌ８． ［６】高义桂，杨一昆，普绍平，等．铂（Ⅱ）类抗癌药物的溶液化学反应特 性ｆＪ］贵金属，２００１，２２（４）：５４－５９． ［７］ＨＥＥＬＬＢＥＲＹ Ｋ．Ｄｕｒｇ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｃｕｔｅ ｒｅｎａｌ ｆａｉｌｕｒｅ ａｆｔｅｒ ｈｅａｒｔ ｓｕｒｇｅｒｙ［Ｊ］．Ｔｈｏｍｘｃｈｉｒｕｒｇｉｅ．１９７５，２３：３９６—４００． 效果持续了相当长的一段时间。正确的干预能够 有效减少注射剂的过度使用，并使注射操作更加安 全，从而减少不良反应和安全隐患。笔者相信，医 师和患者之间的充分沟通，能够让患者对注射剂的 ［８］郑绍建静脉输液微粒的临床危害【Ｊ］．川北医学院学 报，２００２，１７（１）：９５． ３６药品评价２０１１年第８卷第１ ２期
