失血性休克再灌注后早期肠粘膜损伤的实验研究

Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａ１　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　＂Ｃｏ１．１５　ＮＯ．１　２００２　文章编号：１００４—４３３７（２００２）０１—００２２—０３　中围分类号：Ｒ６０５．９７　文献标识码：Ａ　失血性休克再灌注后早期肠粘膜损伤的实验研究　黄飞　景ｚ，－？－　余金甫一　黄海波一　（北京大学深圳医院麻醉科深ｇ１１５１８０３５）　擅薹，　为研究失血性休克再灌注后早期晒粘壤屏障功能损伤以及血清碡脂酶Ａ：（ＰＬＡ２）和脑格膜ｃａ　的变化．将１６．ｑ索兔　随机分为担手术组（Ａ）和单纯休克组（Ｂ），监测再灌注后０．５（Ｒ　Ｌ）小肘、２（Ｒ！）小时、４（ＲＩ）小时血清ＰＬＡ２值，４小时后取肠格膜　ＭＤＡ和钙音量，并取体循环血傲细菌培养．结果显示．Ｂ组血清ＰＬＡ２、脑格膜ＭＤＡ和组织钙古量有明显升高；再藕注后半小时Ｂ组　纳菌移位事明星高于Ａ组（Ｐ＜０．０５）Ｉ光镜和电镜观察表明Ｂ组肠牯睡损伤明显加重。　美ｔ锕，失血性休克・钙超载；脑格膜屏障　失血性休克复苏是临床外伤急救的重要内容．但重症患　Ｂ组肠粘膜ＭＤＡ（６７．８８士１９．０６　ｎｍｏｉ／ｇ・ＷＷ）与Ａ组　者复苏早期的再灌注损伤是多脏器功能失常的主要原因之　（４８．５Ｏ士９．７７ｎｍｏｌ／ｇ・ｗｗ）相比有显著性升高（Ｐ＜０．０５），Ｂ　一。本实验通过失血性休克再灌注的实验研究，进一步探索肠　组粘膜ｃａ抖古量（４．７８士０．９１／￣ｍｏ］／ｇ・ｗｗ）明显高于Ａ组　牯膜屏障破坏的变化以及其对多脏器功能失常综合症促进的　（３．９１士０．５２／￣ｍｏ１／ｇ・ｗｗ）（Ｐ＜０．０５）。　机理．　２．２血清ＰＬＡｚ的变化和细菌穆位率　１材料与方法　再灌注后，Ｂ组ＰＬＡｚ呈进行性上升趋势，与Ａ组相比有　显著升高（Ｐ＜０．０５），见表１。再灌注后半小时．Ｂ组细菌移位　１．１动物模型与分组　率明显高于Ａ组（Ｐ＜０．０５），２、４小时Ｂ组细菌移位也高于Ａ　体重１．９～２．４ｋｇ家兔１６只，雌雄不限．随机分为Ａ组（很　组．但差异无显著性，可能与样本量太小有关，见表２　手术组）和Ｂ组（单纯休克组），每组８只。术前綦食１２／］￣时，自　２．３组织形态学改变　由饮水，戊巴比妥钠４５ｒａｇ・ｋｇ叫腹腔注射麻醉。无菌条件下，气　光镜下，Ｂ组肠粘膜损伤与Ａ组相比差异有高度显著性　臂切开插臂，自主呼吸，分离右股动脉，插臂与ＩＬＳＭ一８３０Ｊ／Ｋ　（Ｐ＜０．０１），见表３。电镜下，Ｂ组表现为肠粘膜上皮徽城毛稀　生理记录仪（日本ＮＩＨＯＮ　ＫＯＨＤＥＮ公司）相连接，监测血压　疏脱落，线粒体肿胀空泡样变，内质网肿胀紊乱，上皮细胞间　和放血。分离右股静脉置臂，用于采血样，给药和输血（液）。肝　桥断裂｝Ａ组呈正常结构。见图ｌ、２。　紊化（６　ｍｇ・ｋｇ　）后，记录血压，从右股动脉放血按Ｌａｍｓｏｎ法　建立休克模型．平均放血量为总血量４５　左右，使ＭＡＰ降至　襄１血清ＰＬＡ　的变化　５．３３Ｋｐｔ且维持９０分钟。９Ｏ分钟后．Ｂ组回蛤自体肝紊化血和　等量平衡液，再观察４小时．Ａ组只进行手术操作．不放血。　１．２观察指标　复苏后Ｏ．５、２、４小时．采集股静脉血标本做细菌培养并用　底物酶促反应法［　测血清ＰＬＡ：值．最后处死动物，取末端回　肠６ｃｍ．生理盐水冲洗，其中４ｃｍ刮取肠粘膜制备组织匀浆测　丙二醛（ＭＤＡ）和组织钙音量。ＭＤＡ测定采用硫代巴比妥酸　组别　Ｒｌ　Ｒ２　Ｒｌ　比色法，组织钙音量运用原子吸收分光光虚法测定。其余２ｃｍ　分别制作成光镜和电髓标本，直接观察肠绒毛损伤程度。光镜　下．根据Ｃｈｉｕ口　肠粘膜损伤评分方法对小肠粘膜损伤进行分　注：分子表示外周静脉血细酋培养阳性数，分母表示各蛆赛　级。　验动曲数。＊与Ａ组比较，Ｐ＜Ｏ．０５。　１．３统计学处理　计量贷料数据以Ｘ＋Ｓ表示，采用Ｆ检验．计数资料用　襄３光镜下动鞠小暖粘膜损伤分级比较　检验．等级赍辩采用Ｗｉｌｃｏｘｏｎ两样本比较法秩和检验．Ｐ＜　Ｏ．０５表示差异显著。　２结果　２　１肠粘膜ＭＤＡ和Ｃａ抖含量变化　注：与Ａ组比较，＊Ｐ＜０．０１。　・孝意职业技术学院解剖教研室　＊＊武汉大学人民医院麻醉科　・２２・　维普资讯 http://www.cqvip.com

敷理医药学杂志　２００２年第ｌ５卷第１期　圈ｌ　Ａ组：正常细胞绒毛结构，搬绒毛，线牲体内质网，细胞间桥裹现正常　圈２　Ｂ组：撒绒毛断囊，排列不整齐，线牲体肿胀空泡样变内质网紊乱　烯酸（ＡＡ）等炎性介质，促进恶性循环的发生发展。　目前认为细胞内钙超载是细胞不可逆损伤的共同通路，　３讨论　在休克有效循环血量减少时，机体为维持重要脏器的血　液供应，通过神经一内分泌调节使肠道的血供减少，同时，肠道　缄毛血管袢扳度弯曲呈发央样结构，动静脉之间存在着逆流　交换机制。因此．城毛顶端在严重低血容量时扳易发生缺血性　损伤，当缺血纠正后，又可产生再赣注损害，这一过程可澈活　中性粒细胞ｔ产生大量氧自由基和炎性介质包括ＴＮＦ、ＰＬＡ　、　ＰＡＦ等　，导致肠内细菌内毒紊移位，进一步澈活炎性介质，　而胞Ｃａ抖的调节主要取决于细胞质膜和内质网／肌浆网（ＥＲ／　ＳＲ）膜结梅的完整性，保证钙通道正常，和质膜上Ｃａ蚪一Ｍｇ件一　ＡＴＰ酶，Ｎａ　一Ｃａ抖交换体及ＥＲ／ＳＲ膜上Ｃａ　一ＡＴＰ酶话性　正常。本实验观察到，休克再赣注后肠桔膜屏障受损，粘膜　ＭＤＡ和Ｃａ件含量明显增加，考虑为大量氧自由基对细胞质　膜和ＥＲ／ＳＲ膜的破坏和有效循环血容量不足，细胞缺氧，　ＡＴＰ合成障碍，ａ　一ＣＭｇ蚪一ＡＴＰ酶和Ｃａ　一ＡＴＰ酶不能发挥　正常功能而造成疆日胞钙含量的持续超载，可澈活细胞内蛋白　酶、ＡＴＰ酶和ＰＬＡ　等，产生氧自由基，分解细胞质瑛产生细　胞毒性物质和炎性介质　叫一　促进加重肠缺血再灌注损伤，对　加重损伤，形成恶性循环，最终引起全身组织器官出现失代偿　高代谢和多脏器功能失常综合症（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　Ｏｒｇａｎ　Ｄｙｓｆｕｎｃ－　ｔｉｏｎ　Ｓｙｎｄｒｏｍ，ＭＯＤＳ）口棚。ＰＬＡ２在其中起重要作用，它的激　活能水解细胞膜磷脂，破坏细胞结构　同时产生ＰＡＦ　花生四　ＭＯＤＳ发展起着重要作用　・２３・　维普资讯 http://www.cqvip.com

ｕｒｎｓｌ　ｏｆ　ＭａｔｂｅｍａｔｉｃａＩ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｖ０【－１５　ＮＯ．１　２００２　文章编号　１００４－４３３７（２００２）０］－００２４—０２　中圈分类号：Ｒ７１４．２２　ｌ　文献标识码：Ａ　血清雌、孕激素水平与输卵管妊娠△　晏长荣　汪琳　孟运莲　罗善云　夏林　（武汉大学医学院组织学与胚胎学教研室武汉４３００７１）　摘要：为撵讨不同术平的血清雌二醇和孕酮耐胚腑异位着床的髟响，撞　了正常官内孕（ＩＵＰ）和｛宣卵营妊韫（ＴＰ）孕妇血清　雌二醇和孕酮水平。结果显示ｒ胚聃正常着床时ｒ血清雌＝群和孕甯木平均较高｛胚胎异位着庠于｛宣卵臂时，血清雌：醇和孕酮均降　低．两组差异高度显著（尸＜０．００１）．　美ｔ谰　雌二醇｛孕甯｝着床｛搬粒子酶免分析技术（ＭＥＩＡ）｛群免疫技术（Ｅ１Ａ）　已知胚胎着床受血清性激素等多种因素的调节。异位妊　（Ｈｕｍａｎ　Ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ　Ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ，ＨＣ６）及Ｂ型超声波检查，　娠（Ｅｃｔｏｐｉｃ　Ｐｒｅｇｎａｎｃｙ，ＥＰ）时，孕妇血清的性激素，特别是孕　井结合临床症状和体征确诊的。正常官内孕孕妇平均年龄为　酮水平降低。因此，临床上常将血清孕酮水平的检测作为异位　３０岁（２３～３９岁），孕龄平均为６３．７天（４６～７０天）。两组均要求　妊娠的辅助诊断手段之一，怛异位妊娠与血清性激素的因果　孕妇前三个月未服任何檄素类药物，输卵臂妊娠孕妇无盆腔　关系及其机理井不清楚。异位妊娠中，ｇ５　以上为输卵臂妊娠　炎和盆腔手术操作史爰使用官内节育器史。　（Ｔｕｂａ［Ｐｒｅｇｎａｎｃｙ，ＴＰ）。奉研究通过输卵管妊娠和正常官内　１．２标奉处理　孕（Ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　Ｐｒｅｇｎａｎｃｙ，ＩＵＰ）孕妇血清雌二醇和孕酮水平　手术前抽取输卵臂妊娠孕妇静脉血２ｍｌ，于３７℃静置ｉｔＪ，　的检测，探讨血清雌二醇和孕酮的不同水平及对胚胎异位着　时后，　３０００ｒ／ｍ离心２分钟，取血清保存于一２０Ｘ３待测。正常　床的影响。　官内孕孕妇血清处理同上。　１．３血清雌二醇和孕酮的检测方法　１材科和方法　血清雌二醇采用微粒子酶免分析技术（Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ　Ｅｎ　１．１材料　ｚｙｍｅ　Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＭＥＩＡ）检测（由美国雅墙公司生产的　从２０００年１０Ｂ～２００１年５月，收集武汉大学中南医院妇科　ＡＸＳＹＭ全自动免疫分析仪），血清孕酮采用酶免疫技术（Ｅｎ－　输卵管妊娠孕妇血清２０例。输卵管妊娠是轻临床诊断、手术和　ｚｙｍｅ　Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＥＩＡ）检测（孕酮酵免定量试剂盘由美国　病检证实的。输卵管妊娠孕妇平均年龄为２ｇ．４岁（２０～３８岁），　ＥＮＥ公司出品）　孕自睾平均为５７．３天（４７～６３天）ｆ同时收集妇科门诊正常早期　１．４统计分折　官内孕孕妇血清２５倒。正常官内孕是经人绒毛膜促性腺激素　实验中各组数据以Ｘ士ｓ形式记录，采用￡检验进行统计　参考文献　６王今达．多脏器功能失常综合盎与晒道内细菌及内毒亲移位．中国　危重宿急救医学．１９９５，７：３２１　１　酥恩锋，吴中立．体液和组轭礴脂群Ａ：倚便快速　定法．第二军　Ｄ￣ｉｔｃｈ　ＥＡ．Ｃ￣ｏｋｌｎｅｓ　ｙｅｓ，Ｃ￣ｏｋｉａｅｓ　ＮＯ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ　ｍａｙｂｅ？Ｃｒｉｔ　医大学学报，１９８９，１０｝２５４．　Ｃ　Ｍｅｄ　１９９３，２１｜８１７　２　Ｃｈｉｕ　ＣＴ．Ｉｎｃ髓ｔｉ岬＾ｍｕ￣ｏｓ￣］ｌｅｓｉｏｎ　ｉｎ　ｌｏｗｆｔｏｗ　ｓｔ￣ｅｓ．Ａｒｃｈ　Ｓｕｒｇ．　ＱｕＷＭ，Ｒｏｚｅｎｆｅ［ｄ　ＲＡ，ＨｕａｎｇＷ．ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｒｏ［ｅ　ｏｆ　ｘａｎｔｈｉｎ￣ｃｏｄ　１９７Ｏ．１０１：４７８．　ｄａｓｅ　ｉｎ　ｐｌａｔｅ［ｅｔ　ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ．　３王木明，崩友生．血小楹擞希园子在烧伤合并内毒毫血症早期腑牯　Ｇｕｔ，１９９９，４４：２０３．　腆损害中的作用．中国危重府急救医学，ＺＯＯ０，ｌＺ：９３．　苏静怕，唐朝枢．缺血一再覆注损伤的普遣性厦其临库意义．北京　４　Ｊｉａｎｇ　ＪＸ　ｒ　Ｂａｈｒａｒｏｌ　Ｓ，Ｃ￣ａｅｎｔｈｅｒ　Ｌ，ｅｔ　ａ＿＿Ｋｉａｔｉｃｓ　ｏｆ　ｅｎｄｏｔｏｘＪｎ　ａｎｄ　医科大学学报，１９９０，２２：１４９　ＴＮＦ　ａｐｐｅａ￣ｎｃｅ　ｉｎ　ｐｏｒｔａｌ　ａｎｄ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｈｅｒｅｏｆ－　ｒｈａｇｉｃ　ｓｈｏｃｋ　ｉｎ　ｒａｔｓ－Ａｎｎ　Ｓｕｒｇ．１９９５，２２１：１００．　５　Ｗｉｌｍｏｒｅ　ＤＷ，Ｓｍｉｔｈ　Ｒｊ，Ｏ’Ｉ）ｗｙｅｒ　ＳＴ，ｅｔ　．Ｔｈｅ　ｇｕｔ｝ａ　ｃｅｎｔｒａ￣　ｏｒｇａｎ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｒｇｉｃａｌ　ｓｔ　ｒ凹ｓ．Ｓｕｒｇｅｒｙ，１９８８．１０４ｌ　９ｉ７．　△本课题由湖北省科委，湖北省计生委基垒贵助（３０１１３０４５３；］３０３８４）　＊武淀天学中南医院捡验科　・２４・