化学表观遗传修饰方法在真菌次级代谢产物研究中的应用_张伟

中国海洋药物

ＣＨＩＮＥＳＥＯＵＲＮＡＬＦ　ＭＡＲＩＮＥＲＵＧＳ　Ｊ　Ｏ　Ｄ

Ｖｏｌ．３３　Ｎｏ．５

，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１４

·综述·

化学表观遗传修饰方法在真菌次级代谢产物

研究中的应用△

＊

张伟，陈敏，邵长伦，王长云＊

（）中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室，医药学院，山东青岛２６６００３

摘　要：真菌产生的次级代谢产物是新药开发的重要资源，其生物合成过程受到众多因素的调控。化学表观遗传操作是利用小分子化学物质抑制真菌中影响表观遗传的酶类，激活沉默的生物合成基因，诱导真菌产生未知的次级代谢产物。化学表观遗传修饰已成为１种简单有效的发现结构新颖的活性次级代谢产物的新方法。本文综述了化学表观遗传修饰调控真菌次级代谢产物的研究进展，并对该方法用于海洋来源真菌次级代谢产物的研究进行了展望。

关键词：真菌；次级代谢调控；化学表观遗传修饰；沉默基因

（）中图分类号：３００９３１　　　文献标志码：００２４６１２０１４０５８３９Ａ　　　文章编号：１Ｒ－－－DOI:10.13400/j.cnki.cjmd.2014.05.013

ｈｅａｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｅｉｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｉｎｔｈｅＴ　　　　　　　　ｐｐｐｇ

ｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｆｒｏｍｆｕｎｉ　　　　ｙｇ　

＊

，，ＷＡＮＧｕＺｌＨＡＮＧ　ＷｅｉＣＨＥＮ　Ｍｉｎ，ＳＨＡＯＣｈａｎｕｎＣｈａｎｎ－－　　ｙｇｇ

（ＫＬｏＭＤＭＥｏＣＳｏＭｅａｂｏｒａｔｏｒａｒｉｎｅ　ｒｕｓ，ｉｎｉｓｔｒｄｕｃａｔｉｏｎｈｉｎａ，ｃｈｏｏｌｅｄｉｃｉｎｅ　　ｆ　ｆ　ｆ　ｙ　ｙｇｙ　　

ＰＯＵｏＣＱＣ２ａｎｄ　ｈａｒｍａｃｃｅａｎ　ｎｉｖｅｒｓｉｔｈｉｎａ，ｉｎｄａｏ６６００３，ｈｉｎａ）　ｆ　ｙ，ｙｇ　

：Ａｒｏｖｅｎｔｏｂｅｔｈｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｒｅｓｏｕｒｃｅｓｆｏｒｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆｎｅｗｄｒｕｓ．ＴｈｅｂｉｏｓｎｂｓｔｒａｃｔＦｕｎｉｈａｖｅ－　　　　　　　　　　　　　ｐｇｐｇｙｇｔｈｅｓｉｓｏｆｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｆｕｎｉｉｓｒｅｕｌａｔｅｄｂｖａｒｉｏｕｓｆａｃｔｏｒｓ．Ｃｈｅｍｉｃａｌｅｉｅｎｅｔｉｃｍａｎｉｕｌａ－　　　　　　　　　　ｙｇｇｙｐｇｐ　　ｔｉｏｎｉｓａｎａｒｏａｃｈｔｈａｔｃｈｅｍｉｃａｌｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌｅｓａｒｅｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｔｏｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｆｕｎａｌｅｎｚｍｅｓｗｈｉｃｈｉｎ－　　　　　　　　　　　　　　　　ｐｐｇｙｆａｉｎｉｎｕｒｏｓｅｏｆｅｎｅｓｉｎｆｕｎｉｆｏｒｔｈｅｌｕｅｎｃｅｔｈｅｅｉｅｎｅｔｉｃｓ．Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｃａｎａｃｔｉｖａｔｅｔｈｅｓｉｌｅｎｃｅ　　　　　　　　　　　　　　　ｇｇｐｐｇｇｐｇ

，ａｃｃｅｓｓｔｏｈｉｔｈｅｒｔｏｕｎｋｎｏｗｎｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅｃｈｅｍｉｃａｌｅｉｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｈａｓｂｅ－　　　　　　　　ｙｐｇ　ｃｏｍｅａｎｅｗ　ｍｅｔｈｏｄｔｏｏｂｔａｉｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｌｎｏｖｅｌａｎｄｂｉｏｌｏｉｃａｌｌａｃｔｉｖｅｎａｔｕｒａｌｒｏｄｕｃｔｓｓｉｍｌａｎｄｅｆ－　　　　　　　　　　　ｙｇｙｐｐｙ　　　

，ｆｅｃｔｉｖｅｌ．Ｉｎｔｈｉｓａｅｒｔｈｅａｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｅｉｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｉｎｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆ　　　　　　　　　　　　ｙｐｐｐｐｐｇｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｆｒｏｍｆｕｎｉｗｅｒｅｒｅｖｉｅｗｅｄ．Ａｎｄｔｈｅｅｒｓｅｃｔｉｖｅｆｏｒｔｈｅｓｔｕｄｏｎｓｅｃｏｎｄａｒｍｅ－　　　　　　　　　　ｙｇｐｐｙｙ　　　ｔｄａｂｏｌｉｔｅｓｆｒｏｍ　ｍａｒｉｎｅｅｒｉｖｅｄｆｕｎｉｂｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗａｓａｌｓｏｒｏｓｅｃｔｅｄ．－　　　　　　　ｇｙｐｐ　

：；；；Ｋｅｗｏｒｄｓｆｕｎｉｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｒｅｕｌａｔｉｏｎｃｈｅｍｉｃａｌｅｉｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｉｌｅｎｃｅｅｎｅ　　　　ｇｙｇｐｇｇｙ　　　　全基因组测序工程研究发现真菌中存在大量

编码化合物的基因，某些物种拥有的这些基因所

能编码的化合物的数量远大于目前从中分离得到

］１３－。微生物次级代谢产物的生物的化合物数量［

）国家自然科学基金（资助８１１７２９７７；４１３２２０３７＊△基金项目：

，男，硕士研究生，张伟（研究方向：海洋天然产物化学。９８７１－）　作者简介：

：，男，教授、王长云（博士生导师，研究方向：海洋药用生物资源中药物先导化合物的发现。Ｅ－ｍ９６５ａｉｌｃｈａｎｕｎ＠１－）＊通讯作者：ｇｙｏｕｃ．ｅｄｕ．ｃｎ

０２０１４４８２－－　　收稿日期：

４８　中　国　海　洋　药　物３３卷

合成过程受到众多因素的调控。研究发现，微生物的许多基因在实验室培养条件下处于沉默状

２］

。因此，态［微生物沉默基因的表达以及新的代

子化学物质来抑制真菌中影响表观遗传的酶类从

６］

。目前已有化学表而达到影响代谢产物的效果［

观遗传修饰方法应用于真菌次级代谢产物研究的相关报道，已有报道主要集中在有限的昆虫内生真菌和植物内生真菌的应用中。在海洋来源真菌次级代谢产物研究中的应用也有成功的报道。本文对化学表观遗传修饰在真菌次级代谢产物研究中的应用进行综述，以期为将化学表观遗传修饰的方法应用于海洋真菌次级代谢产物研究提供参考。

运用化学表观遗传操作对真菌次级代谢产物进行研究时，主要用到２类抑制剂：一类是组蛋白去乙酰化酶抑制剂，包括辛二酰苯胺异羟肟酸，、（辛二ｕｂｅｒｏｌａｎｉｌｉｄｅｈｄｒｏｘａｍｉｃａｃｉｄＳＡＨＡ）ｓ　　ｙｙ

，酰二异羟肟酸（ｈｄｕｂｅｒｏｌｂｉｓｒｏｘａｍｉｃａｃｉｄＳＢｓ－－　ｙｙ）和丁酸钠（、烟酰胺（ＨＡ）ｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅｏｄｉｕｍｎｓ

）等，能够结合到组蛋白去乙酰化酶的活ｂｕｔｒａｔｅｙ性位点，抑制该酶的活性，从而使组蛋白乙酰化水平升高，核小体结构松弛利于转录因子及协同转录因子与Ｄ提高转录水平激活沉ＮＡ分子的结合，

１３，１６］

。另一类为Ｄ默基因的表达［ＮＡ甲基化转移

谢产物的发现已成为天然产物研究的热点和难

４］

。通过改变培养方式、分子水平的基因操点［

５］６］

，和化学表观遗传修饰等方法［可激活微生作［

物沉默基因，从而表达新的次级代谢产物。但是，依赖于培养方式变化来影响次级代谢的方法存在一些问题，如大规模筛选导致工作强度的加大，效率的降低，实验预期的非定向性以及较差的可重复性。而分子水平的基因操作尽管具有广阔的发展前景，但仍存在一些有待解决的问题，如高效遗传操作系统的缺乏，目的基因定位与克隆的准确性差，基因转化效率普遍较低，以及宿主细胞的不

６］

。鉴于上述原因，兼容性等［近年来化学表观遗

传修饰方法被引入到微生物沉默基因调控研究中。研究表明，在丝状真菌的表观遗传现象中，染色体状态的变化能够激活沉默基因的表达，从而

］７８－。影响真菌次级代谢产物的生物合成［

组蛋白的乙酰化和去乙酰化可以影响染色体的状态。乙酰化由组蛋白乙酰基转移酶（ＨＡＴ）催化，去乙酰化由组蛋白去乙酰化酶（ＡＣ）催ＨＤ

化，组蛋白依靠这２种酶来维持乙酰化的水

］１９０－。正常情况下，由于组蛋白去乙酰化酶的作平［

）、酶抑制剂，包括５ａｚａｃｔｄｉｎｅ５５－氮杂胞苷（－－氮－ｙ

）、２ａ２ｄ１′ｚａ′ｅｏｘｃｔｉｄｉｎｅＧ０８和Ｒ５－脱氧胞苷（－－－－ｙｙ

［７］

，能够与Ｄ西奈芬净（ｉｎｅｆｕｎｉｎ）等１ＮＡ甲基ｓｇ

用，组蛋白赖氨酸残基的ε－氨基上乙酰化水平很低，赖氨酸残基上的氨基存在质子化现象，使得组蛋白带正电荷，与带负电荷的ＤＮＡ因静电效应而紧密结合，当乙酰基转移酶将乙酰基转移到赖氨酸残基的ε氨基上的正电荷被消除，－氨基上时，ＮＡ分子由于本身的负电荷使核小体结构变得Ｄ

松弛，利于转录因子及协同转录因子与ＤＮＡ分子

］１１１３－。的接触，因此可以激活特定基因的转录过程［

化转移酶共价结合，竞争性抑制胞嘧啶与尿嘧啶

］１１８９－，降低Ｄ增的甲基化［ＮＡ分子的甲基化水平，

加基因中启动子与转录调控因子识别位点的特异

０］２

。下面分别就性，从而激活基因的转录和表达［

这两类化学表观遗传修饰剂在真菌次级代谢产物研究中的应用进行阐述。

１　组蛋白去乙酰化酶抑制剂在真菌次级代谢产

物研究中的应用

国际上，ｓａｉ研究组运用化学表观遗传修饰Ａ调控真菌次级代谢产物的报道较多。该研究组在０１１年将化学表观遗传修饰的方法分别应用于２２

株昆虫内生真菌Ｔｌｏｒｒｕｂｉｅｌｌａｕｔｅｏｒｏｓｔｒａｔａ和　Ｃａｌｏｒｄｃｅｓｎｎｕｌｌａｔａ。将真菌Ｔ．ｕｔｅｏｒｏｓｔｒａｔａ　ｙｐ在含有组蛋白去乙酰化酶抑制剂ＳＢＨＡ（１

／发酵产物指纹图谱分ｍｍｏｌＬ）的培养基中培养，析发现，与不加抑制剂的对照组相比，添加组多出追踪分离获得３个结构新颖的色氨酸３个色谱峰，

ＤＮＡ的甲基化也可以影响染色体的状态。ＮＡ甲基化是由ＳＤ－腺苷甲硫氨酸作为甲基供体

在Ｄ将ＮＡ甲基转移酶（ＮＭＴｓ）的作用下，ＤＮＡ链上ＣＤＧ二核苷酸中胞嘧啶的５位碳甲基ｐ

［４］１

化，成为５－甲基胞嘧啶。这一变化直接干扰了转录因子与基因启动子中特异识别位点的结合，同时由于胞嘧啶５位引入了甲基使分子结构发生了变化，ＮＡ与蛋白质的结合也随之发生变化，Ｄ

３，１５］１

。引起基因转录的抑制，最终导致基因沉默［

Ｃｉｃｈｅｗｉｃｚ等最早提出设想运用外源的小分

５期张伟，等：化学表观遗传修饰方法在真菌次级代谢产物研究中的应用５８　

，以异戊二烯类化合物ｌｕｔｅｏｒｉｄｅｓＡ–Ｃ（１～３）　及２个已知化合物ｔｅｒｅｚｉｎｅＤ（４）和ｐａｅｃｉｌｏｄｅ－　ｐ

［２１］

（）。其中３个新化合物见图１）ｓｉｅｔｉｄｅＡ（５　ｐｐ

均含有天然产物中罕见的肟基官能团。将真菌

新的二氢苯并呋喃类化合物ａｎｎｕｌｌａｔｉｎｓＡ–Ｄ　（）和１个新的芳香聚酮类化合物ａｎｎｕｌｌａｔｉｎ６～９

［２２］

（）。其中化合物６显示很强的大见图１）Ｅ（１０

麻素Ｃ化合物７Ｂ１受体和ＣＢ２受体激动剂活性，

／Ｃ．ａｎｎｕｌｌａｔａ在含ＳＢＨＡ（５００μｍｏｌＬ）的培养

基中培养，发现与对照组相比，菌株次级代谢产物种类明显变得丰富。从添加组粗浸膏中获得４个

和９显示出ＣＢ１受体激动剂活性和ＣＢ２受体拮抗剂活性。

图１　化合物１～１０的结构Ｆｉ．１　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ１～１０　　　ｇｐ

／０１２年，Ａｓａｉ研究组又运用１ｍｍｏｌＬ的　　２

ｉＳＢＨＡ刺激１株昆虫内生真菌Ｃｏｒｄｃｅｓｎｄｉ　ｙｐｇ－从该菌的发酵培养液中分离获得６个骨架ｏｔｉｃａ，

新颖的芳香聚酮类化合物ｉｎｄｉｏｔｉｄｅｓＣ–Ｆ（１１　ｇ，１ｈｄ４）３ｒｏｘｉｎｄｉｏｔｉｄｅＡ（１５）和８－－Ｏ－～１　ｙｙｇ

），以及２个已知化合物ｉｍｅｔｈｌｉｎｄｉｏｔｉｄｅＢ（１７ｎ－　ｙｇ

［２３］

（）和Ｂ（）。其中新化）见图２ｄｉｏｔｉｄｅＡ（１６１８　ｇ

合物１可能是通过１～１３属于聚酮二聚体新骨架，

化酶抑制剂（烟酰胺，ｉｒｔｉｎｏｌ和ｓｌｉｔｏｍｃｉｎ）对ｓｐｙ发ｍ１株真菌Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ　ｏｌｌｉｉｌｉｕｍ进行培养，ｐ／现在含有１次级代００μｍｏｌＬ烟酰胺的培养基中，谢产物最为丰富。继而从该粗提物中分离获得了３碳链状聚酮类化合物ｍｏｌｌｉｉ５个骨架新颖的１－ｐ），此外还获得２个已知化合物ｌｉｎｓＡ–Ｅ（１９２３　～

［］２４

（见图和（–）ａｏｌｌｉｉｌｉｎＦ（２４）ｕｒｅｏｎｉｔｏｌ（２５）ｍ－　ｐ

。其中化合物１）１９和２０对ＨＣＴ１６细胞显示中２－］［环加成或者Ｍｉｃｈａｅｌ加成反应合成而来。４＋２

同年，该研究组分别运用３种不同组蛋白去乙酰

／等强度的生长抑制活性，Ｉ．８μｍｏｌＬ和Ｇ５０分别为１／３．７μｍｏｌＬ。

图２　化合物１１～２５的结构Ｆｉ．２　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ１１～２５　　　ｇｐ

ｓａｉ研究组除将化学表观遗传修饰法运用于　　Ａ

昆虫内生真菌次级代谢产物的研究外，还将该方法运用于植物内生真菌次级代谢产物的研究中。／该研究组用含有１０１３年，０μｍｏｌＬ烟酰胺的培２

养基发酵１株来源于芍药Ｐｌａｅｏｎｉａａｃｔｉｌｏｒａ叶　ｆ片的真菌ＧＨＰｃｒａｈｉｏｓｉｓｈｌｏｒｏｃｅｈａｌａ，ＬＣ分析　ｐｐｐ发现添加组次级代谢产物的丰富程度相比对照组明显提高。从添加组中分离获得一系列骨架新颖

６８　中　国　海　洋　药　物３３卷

的二苯甲酮类化合物ｃｅｈａｌａｎｏｎｅｓＡ–Ｆ（２６～　ｐ）和１个已知化合物２ｄ４２，６３１ｉｈｄｒｏｘｅｔｈ－（－－－ｍ－ｙｙ

［２５］

（）见图ｌ６ｈｄｂｅｎｚｏｌｒｏｘｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ（３２）－－　ｙｙｙｙ。２０１３年，Ａｓａｉ研究组发现，当丝状真菌３）

／Ｃｉｈａｅｔｏｍｉｕｍｎｄｉｃｕｍ在添加有５００μｍｏｌＬＳＢ　－　能产生一系列新的ｃＨＡ的培养基中发酵，ｈａｅｔｏ－［６］

，其中化合物ｃｈｅｎｏｌｓ类化合物２ｈａｅｔｏｈｅｎｏｌｓｐｐ）具有新颖的多环骨架。此外还发Ｃ–Ｅ（３５～３７

现参与ｃｈａｅｔｏｈｅｎｏｌｓ类化合物合成的２个基因ｐ）（的表达与组蛋白乙酰化水１和ｐ２ｋｋｓＣＨ－ｓＣＨ－ｐ平的高低密切相关。同年，该研究组再次将该菌／用含５除００μｍｏｌＬＳＢＨＡ的培养基大规模发酵，　获得上述的ｃ还发现了ｈａｅｔｏｈｅｎｏｌｓ类化合物外，ｐ２个少量的骨架新颖的螺内酯类聚酮化合物ｓｉ－ｐ

［２７］

（）。）见图３ｒｏｉｎｄｉｃｕｍｉｄｅｓＡ和Ｂ（３９，４０　

图３　化合物２６～４０的结构Ｆｉ．３　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ２６～４０　　　ｇｐ

００９年，Ｈｅｎｒｉｋｓｏｎ等将１株来源于土壤的　　２

／黑曲霉Ａｎｓｅｒｉｌｌｕｓｉｅｒ在含有１０μｍｏｌＬＳＡ　－　ｐｇｇ得到１个具有１ＨＡ的半固体培养基中培养，－苯

［８］２

基吡啶－４ｅｒｏｎｅＡ（４１）－酮母核的新化合物ｎ　ｇｙ（。２见图４）０１１年，Ｖｅｒｖｏｏｒｔ等用ＳＡＨＡ刺激１。当Ｓ株海洋沉积物来源真菌ＭｓｉｃｒｏａｓｃｕｓＡ　－ｐ．

／从中分离发现１个由ＨＡ的量为１ｍ０－４ｏｌＬ时，混源生物合成途径产生的骨架新颖的环缩酚酸肽

［２９］（）。该化合物的生物合见图４）５ＧＭ－５６（４２Ｅ

成一部分经过ＮＲＰＳ途径另一部分经过ＰＫＳ途

／为１而对细胞Ａ３μｍｏｌＬ，５４９的细胞毒活性ＩＣ９０

／为４表明化合物４３７μｍｏｌＬ，６属于高效低毒类化合物。该化合物对金黄色葡萄球菌Ｓｔａｈｌｏｃｏｃ－ｐｙ最小抑制浓度为ｃａｕｓｕｒｅｕｓ也有较好的抗菌活性，　

／·５μｍｏｌＬ。２０１３年，Ｃｈｕｎ．５ｍｍｏｌ７ｇ等用含有０

　ＳＬ－１ＡＨＡ的天然培养基发酵１株丝状真菌

指纹图谱分析发现比对照组多Ｂｅｅａｕｖｅｒｉａｌｉｎｅ，　ｆ出４个色谱峰，追踪分离获得一系列环缩酚酸类化合物，包括３个新化合物ｄｅｓｍｅｔｈｌｉｓａｒｉｄｉｎＥ　ｙ（，ｄ４７）ｅｓｍｅｔｈｌｉｓａｒｉｄｉｎＣ２（４９）和ｉｓａｒｉｄｉｎＦ　　ｙ

３１］

（（），。化合物见图４）以及５个已知化合物［５１

１含有在天然多肽中罕见的Ｎ５－甲基丁基酸片段。

活性测试显示，化合物４７能够抑制超氧化物阴离·Ｌ－１），化合子的产生（Ｃ１０．００±０．８０μｍｏｌＩ５０＝物４９能够阻止弹性蛋白酶的释放（Ｃ０．０１Ｉ０＝１５

０－

）·Ｌ。化合物４±０．４６μｍｏｌ７和４９均显示强

的抗炎活性。２０１３年，Ｃｈｅｎ等将１株分离自药用

径。该研究是运用化学表观遗传修饰激活沉默基因获得混源途径来源天然产物的１个范例。０１２２年，Ｂｅａｕ等为了提高红树林来源真菌Ｌｅｕｃｏｓｔｏｍａｅｒｓｏｏｎｉｉ次级代谢产物ｃｏｓｏｒｏｎｅｓＢ–Ｅ（４３，ｔ　ｐｙｐ）的产量，用加入丁酸钠的培养基来发酵培４５，４６养，化合物ｃｏｓｏｒｏｎｅｓＢ–Ｅ的产量明显提高，ｔ　ｐｙ同时在发酵产物中还分离得到了１个新化合物

［０］３

（，见图４）以１对外消旋对ｏｓｏｒｏｎｅＲ（４４）ｃｔ　ｐｙ

映体的形式存在。化合物４６显示了良好的生物

植物ＤｓａｔｕｒａｔｒａｍｏｎｉｕｍＬ中的内生真菌Ｆｕｓａｒ　－／在含有５ｉｏｓｕｍ　ｘｓｏｒｕｍ　００μｍｏｌＬＳＢＨＡ　ｐ．ｆ．ｙｐ的土豆固体培养基中培养，粗浸膏指纹图谱分析

活性，对疟原虫Ｐａｌａｓｍｏｄｉｕｍ　ｌｃｉａｒｕｍ的ＩＣｆｐ０９

５期张伟，等：化学表观遗传修饰方法在真菌次级代谢产物研究中的应用７８　

与对照相比增加了２个色谱峰，分离鉴定发现２，个新的镰孢菌酸类衍生物５ｂ６ｏ１６ｄｕｔｌｘｏｉ－－－－－－ｙ和５ｈｄ２ｃ９ｂｒｏｒｉｄｉｎｅａｒｂｏｘｌｉｃａｃｉｄ（５５）ｕｔ－－－（－－　ｙｐｙｙ

，６ｅ６ｏ１ｄ２ｃｎｌ）ｘｏｉｈｄｒｏｒｉｄｉｎｅａｒｂｏｘｌｉｃ－－－－－－ｙｙｐｙｙ

［３２］（）。同年，见图４）ａｃｉｄ（５６ａｎＹｇ等运用含２种

／组蛋白去乙酰化酶抑制剂ＳＢＨＡ（５００μｍｏｌＬ）

ｃａｎｓ显示中等强度的抗菌活性。２０１４年，Ｍｉａｏ等将１株分离自海藻Ｓｕａｒａｓｓｕｍ　ｓｉｏｒｍｅ组织中ｆｇｆ／的曲霉真菌Ａｗｓｅｒｉｌｌｕｓｅｎｔｉｉ在含有２０μｍｏｌ　ｐｇ分离获ＬＳＡＨＡ的固体土豆平板培养基中培养，　

得２个新的芳香二萜类化合物ａｓｅｗｅｎｔｉｎｓＡ　ｐ）（）、和１个已知的氧化衍生物ａ１ｓｅｗｅｎｔｉｎ６０Ｂ（６ｐ

［３４］

（）。活性测试显示，见图４）这３个化合Ｃ（６２物对海洋来源的浮游藻类及卤虫都显示强的生长抑制活性。化合物６ｍ０对微藻Ｃｈａｔｔｏｎｅｌｌａ　ａｒｉｎａ和Ｈａｅｔｅｒｏｓｉｍａｋａｓｈｉｗｏ的ＬＣ．８１　ｇ５０分别为０／／化合物６ｍｏｌＬ和２．８８μｍｏｌＬ；２对微藻Ａｌｅｘ－μ

／的Ｌ化合物６ａｎｄｒｉｕｍｓＣ．７３μｍｏｌＬ；１对ｐ．５０为８

／卤虫Ａｓｒｔｅｍｉａａｌｉｎａ的ＬＣ．３６μｍｏｌＬ。　５０为６

／和烟酰胺（０μｍｏｌＬ）的土豆培养基来培养１株５

从粗浸膏植物内生真菌Ｓｎｔａｏｎｏｓｏｒａｏｄｏｒｕｍ，　ｇｐ中分离获得１个结构新颖的丁酰基苯类化合物））（４２＇ｅｔｈｏｘＳｅｔｈｌｂｕｔｒｏｈｅｎｏｎｅ（５７＋）－－ｍ－（－ｍｙｙｙｐ

和２个已知的聚酮化合物ａ和ｌｔｅｒｎａｒｉｏｌ（５８）

［３３］

（（见图–）３Ｒ）ｅｌｌｅｉｎｍｅｔｈｌｅｔｈｅｒ（５９）－（－ｍ　　ｙ

。活性测试显示这３个化合物对真菌Ｆ）ｕｓａｒｉ４－ｕｓＡｔａｍｏｌａｎｉ，ｓｅｒｉｌｌｕｓｅｒｒｅｕｓ和Ｃａｎｄｉｄａｌｂｉ　　　－ｐｇ图４　化合物４１～６２的结构ｉ．４　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ４１～６２Ｆ　　　ｇｐ

２　ＤＮＡ甲基化转移酶抑制剂在真菌次级代谢产物研究中的应用

Ｗａｎ０１０年，２ｇ等将１株分离自大西洋沿岸

土壤中的真菌Ｐｃｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｉｔｒｅｏｎｉｒｕｍ在含有ｇ／０μｍｏｌＬ）的大米培养基中培养，５５－氮杂胞苷（

真菌表面的水珠颜色由原来的无色变为红色，分析发现次级代谢产物比对照组丰富。从添加组中分离获得９个化合物，包括２个新的ｍｅｒｏｔｅｒｅｎｅｓｐ）和Ｂ（），类化合物ａｔｌａｎｔｉｎｏｎｅｓＡ（７１７２６个嗜氮　，ｓ酮类化合物ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｉｎ（６３）ｃｌｅｒｏｔｉｏｒａｍｉｎｅ（），，６４ｃｈｒｅｈｉｌｏｎｅ（６５）ｅｃｈｌｏｒｏｉｓｏｃｈｒｏｍｏｈｉｏｄ－ｐｐ，ｄｌｏｎｅＩＩ（６６）ｅｃｈｌｏｒｏｉｓｏｃｈｒｏｍｏｈｉｌｏｎｅＶ　Ｉ　Ｉｐ

（，６（Ｅ，５，７ｄ２５６７）ｉｍｅｔｈｌｅｔｈｌｅ３　Ｅ）－（－－－－ｍ－ｙｙ

）ｎ３，５ｄ２，４ｄ３ｅｎｏｎａｉｅｎｌｉｈｄｒｏｘｅｔｈｌｂｅｎｚ－－－－－－ｍ－ｙｙｙｙ

［５］

），ａｌｄｅｈｄｅ（６８ｎｃｏｌｉｄｅ（６９）及其衍生物７０３ｅｙｐ

（。抗菌测试显示，）见图５化合物６３和６４对金黄

色葡萄球菌Ｓ．ｅｉｄｅｒｍｉｄｉｓ的生长显示中等强度ｐ的抑制作用。２Ａｓａｉ研究组从昆虫内生真０１１年，菌Ｃｉｏｒｄｃｅｓｎｄｉｏｔｉｃａ普通培养基中分离获得　ｙｐｇ１个新的芳香聚酮糖苷类化合物ｉｎｄｉｏｔｉｄｅＡ　ｇ（），同时还得到了５个缩肽类化合物ｄ７３ｅｓｔｒｕｘｉｎｓ）以及１个聚酮类化合物Ｂ，Ｂ７Ａ，Ａ５７９～２，２和Ｅ（

）／。当用含有１３Ｇ９３（８０００μｍｏｌＬ５Ｎ－－氮杂胞苷的　土豆液体培养基重新发酵该菌时，发现该菌在产生

８８　中　国　海　洋　药　物

［］３６

（）。）见图５苷类化合物ｉｎｄｉｏｔｉｄｅＢ（７４　ｇ

３３卷

上述化合物的同时，又产生了１个新的芳香聚酮糖

图５　化合物６３～８０的结构ｉ．５　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ６３～８０Ｆ　　　ｇｐ

０１３年，Ｃｈｕｎ　　２ｇ等发现１株来自海洋沉积物

的黑曲霉Ａｓｄｓｅｒｉｌｌｕｓｏｗｉｉ在普通培养条件下　ｙｐｇ的发酵产物经ＨＰＬＣ分析仅出现２个色谱峰。而

／该菌在培养过程中加入１００μｍｏｌＬ５－氮杂胞苷　时，发酵产物经分离获得了３个新的没药烷倍半，萜类化合物（７＋）Ｓ）ｅｔｈｌｓｄｏｎｏｌ（８１）７－（－－Ｏ－ｍｙｙ，（１ｈｄ＋）Ｓ，１１Ｓ）２ｒｏｘｓｄｏｎｉｃａｃｉｄ（８２）７７－（－－－　ｙｙｙ

和８个已知化ｄ７，１ｄｅｏｘ４ｉｄｅｈｄｒｏｓｄｏｎｏｌ（８５）－－ｙｙｙ

３７］

（。化合物８）见图６合物［３显示强的抗炎活性，

／，阻止弹性蛋白酶的释放（０．５５μｍｏｌＬ）ＣＩ５０＝

／；同时在脂肪细胞中具有促１６．３９±１．６４μｍｏｌＬ）进葡萄糖降解和抑制脂肪积累的作用，具有潜在的抗糖尿病作用。２０１４年，Ｙａｎｒａ－ｇ等从植物Ｆｃａｒｉａｈｉｌｏｅｎｓｉｓ叶片中分离得到１株内生真菌　ｇ将该菌在含有５Ｐｃｅｓｔａｌｏｔｉｏｓｉｓｒａｓｓｉｕｓｃｕｌａ，００　ｐ／代ｍｍｏｌＬ５－氮杂胞苷的土豆液体培养基中培养，　

谢产物与对照组相比明显增加，经分离获得１个和６个已知新的香豆素类化合物ｃｏｕｍａｒｉｎ（９２）

［３８］

（）。）见图６化合物（３～９８９

能够抑制超氧化物阴离子的产生（Ｃ．２３±Ｉ５０＝５

图６　化合物８１～９８的结构Ｆｉ．６　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ８１～９８　　　ｇｐ

３　两类抑制剂共同作用在真菌次级代谢产物研

究中的应用

Ａｓａｉ研究组发现１株来源于昆虫的０１２年，２

内生真菌Ｇａｏｉｂｅｌｌｕｌｒｍｏｓａｎａ在普通培养条件　ｆ下，其发酵粗浸膏的指纹图谱几乎没有显示任何次级代谢产物。而将该菌在同时含有组蛋白去乙酰化酶抑制剂ＳＢＨＡ和ＤＮＡ甲基化转移酶抑制剂Ｒ分离获得次级代谢产物１Ｇ０８培养基中培养，－包括２个新的高度氧化的麦角固醇ｆ３个，ｏｒｍｏｓ１－）和Ｂ（），ｔｅｒｏｌｓＡ（９９１０１ｓａｒｉｏｔｉｎ类衍５个新的ｉ　，１生物１ａｅｉｉ２′ｃｅｔｌｉｓａｒｉｏｔｉｎＡ（１０２）ｓａｒｉ－Ｏ－－－－　ｙｐ，，ｏ１ｔｉｎＡ（１０５）ｓａｒｉｏｔｉｎｓＫ－Ｍ（１０，１０８，１０９）ｉ　　以及６个已知化合物２ｅｏ３，１２，２３ｘ２，１４，１６－－－ｐｙ

ｔ５，７ｄ１ｏｅｔｒａｈｄｒｏｘｅｒｏｓｔａｉｅｎ１ｎｅ（ｎａｍｅｄ－－－－　ｇｙｙ，ｆｏｒｍｏｓｔｅｒｏｌＣ）（０１）ｓａｒｉｏｔｉｎｓＡ，Ｃ，Ｅ（１０３，１ｉ　　

，ＴＫ５１１１０，１０７）７６４Ａ（１０４）和ｂｅａｕｖｅｒｉｃｉｎ－－５期张伟，等：化学表观遗传修饰方法在真菌次级代谢产物研究中的应用９８　

［３９］

（（）。其中化合物９见图７）１１１９～１０１中含有基中，从发酵液中分离获得１个骨架新颖的四元，另外还得环螺酮缩醇化合物ｔｅｎｕｉｒｏｎｅ（１１２）ｐｙ到了２个已知的１０碳链聚酮化合物ｃｅｈａｌｏｓ－ｐ

［４０］

（））。）见图７和Ｆ（ｏ１１４ｒｏｌｉｄｅｓＢ（１１３　ｐ

顺式的环氧化结构，在天然甾醇及三萜类化合物中非常少见。同年，该研究组同时将组蛋白去乙酰化酶抑制剂ＳＢＨＡ和ＤＮＡ转移酶抑制剂５－氮杂胞苷加入昆虫内生真菌Ｉｔｓａｒｉａｅｎｕｉｅｓ的培养　ｐ图７　化合物９９～１１４的结构Ｆｉ．７　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ９９～１１４　　　ｇｐ

０１３年，Ｙａｎｓｔｉ　　２－ｇ等将１株植物内生真菌Ｕ／ｌｍａｏ　ａｄｉｓ在同时含有５００μｍｏｌＬＳＢＨＡ和　ｇｙ／粗５００μｍｏｌＬ５－氮杂胞苷的土豆培养基中培养，　浸膏的指纹图谱分析与对照组比较发现多出２个色谱峰，从中分离获得１个结构新颖的糖脂酸和１个已知的糖ｏｌｉｉｄｕｓｔｉｌａｉｃａｃｉｄＣ（１１５）ｌｃ　　　ｐｇｇｙ

［１］４

（。化合物见图８）脂酸ｕｓｔｉｌａｉｃａｃｉｄＢ（１１６）　　ｇ对真菌１５和１１６显示中等强度的抗真菌活性，１

氮杂胞苷的土豆培养基中培养，发现次级代谢产物的种类增多且产量提高，分离鉴定获得３个新的芳香化合物２ｈｄ６ｈｄ４′ｒｏｘ′ｒｏｘｍｅｔｈｌ′－－－－－ｙｙｙｙｙ

ｍ２，６ｄ３ｉ２ｅｔｈｌｈｅｎｌｉｈｄｒｏｘｓｏｅｎｔｅｎｌ）－－－－（－ｙｐｙｙｙｐｙ（，ｄ７ｈｄｂｅｎｚｏａｔｅ１１７）ｉｈｄｒｏｘｒｏｘｍｅｔｈｌ４，６－－－－ｙｙｙｙｙ

，４，３ｄ３，７ｅｔｈｌｃｏｕｍａｒｉｎ（１１８）ｉｈｄｒｏｘ６－ｍ－－－ｙｙｙ），以及５个已知的聚酮化ｄｉｍｅｔｈｌｃｏｕｍａｒｉｎ（１１９ｙ

，，合物ｅｎｄｏｃｒｏｃｉｎ（１２０）ｓｔａｌｏｔｉｏｌｌｉｄｅＢ（１２１）ｅ　ｐ）），和ｒｓｔａｌｏｔｉｏｏｎｅＧ（１２２ｃｉｒｒｏｎｅＡ（１２３ｅｓ－　　ｐｙｐｙｐ

ｈｄ２ｈｄ７ｒｏｘｒｏｘｒｏｌ－－－（２－ｙｙｙｙｐｐｙ

［４２］

（）。）见图８ｃｈｒｏｍｏｎｅ（１２４

）５ｅｔｈｌ－－ｍ－ｙ

Ａｔａｓｅｒｉｌｌｕｓｅｒｒｅｕｓ和Ｃａｎｄｉｄａｌｂｉｃａｎｓ的ＭＩＣ　　ｐｇ／／值在５ｍＬ范围之内。同年，ｍＬ到１００μ０μｇｇ该研究组将１株植物内生真菌Ｐａｅｓｔａｌｏｔｉｏｓｉｓｃａ－　ｐ／／ｃｉａｅ在含有５００μｍｏｌＬＳＢＨＡ和５００μｍｏｌＬ５－　　

图８　化合物１１５～１２４的结构Ｆｉ．８　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｍｏｕｎｄｓ１１５～１２４　　　ｇｐ

０９　中　国　海　洋　药　物３３卷

４　结语

上述研究充分表明，化学表观遗传修饰剂在调控真菌次级代谢产物的表达上具有重要的作用。化学表观遗传修饰在真菌次级代谢产物研究中具有很多的优点。首先，该方法为快速挖掘和获得真菌中潜在的次级代谢产物提供了一个有力的工具，提高了发现新化合物的机率；其次，该方法运用于天然产物研究，具有实验周期短、操作简单、成本低、效率高等特点，既可用于模式真菌又可对遗传背景不清楚的真菌进行修饰，不受实验条件的限制，在大多数实验室中都能实现，应用范围广阔。无可否认，化学表观遗传修饰对真菌次级代谢产物的改变具有不定向性，并且通过这种方法实现的表观遗传在真菌传代中很不稳定，重复性较差。作者认为，将基于分子水平的基因操作技术和表观遗传修饰方法结合起来可提高定向性和稳定性，即先使用小分子抑制剂来测试表观遗传修饰是否能影响次级代谢产物的生物合成，然后通过分子水平操作来定向改变表观遗传酶类的表达，稳定提高目的代谢产物的表达水平，从而获取新的化合物。尽管真菌的化学表观遗传修饰研究尚处于起始阶段，可喜的是，对海洋来源真菌的化学表观遗传修饰研究已有多项尝试，并取得了一定的进展。随着相关学科的相互渗透，化学表观遗传修饰在海洋来源真菌沉默基因的表达及新颖结构活性次级代谢产物的发现研究中将不断发展和完善，从而为海洋新药研究开发提供更多的先导结构。参考文献

［］ｉｌｋｉｎｓｏｎＢ，ＭｉｃｋｌｅｆｉｅｌｄＪ．Ｍｉｎｉｎａｎｄｅｎｉｎｅｅｒｉｎｎａｔｕｒａｌ１　　　　Ｗ－ｇｇｇ　　

］２ＮＣＢｒｏｄｕｃｔｂｉｏｓｎｔｈｅｔｉｃａｔｈｗａｓ［Ｊ．ａｔｈｅｍ　ｉｏｌ，００７，３　　　ｐｙｐｙ（）：３７７９８６．３－［］２ｃｈｅｒｌａｃｈＫ，ＨｅｒｔｗｅｃｋＣ．Ｔｒｉｅｒｉｎｃｒｔｉｃｎａｔｕｒａｌｒｏｄ－　　　Ｓ　　ｇｇｇｙｐｐ　

［］ｃｔｂｉｏｓｎｔｈｅｓｉｓｉｎｍｉｃｒｏｏｒａｎｉｓｍｓＪ．ｒｉｏｍｏｌｈｅｍ，ｕＯＢＣ　　　　ｙｇｇ　（）：２１００９，７９７５３７６０．１－［］３ｅｒｉｋｌＭ，ＣｈａｌｌｉｓＧＬ．Ｓｔｒａｔｅｉｅｓｆｏｒｔｈｅｄｉｓｃｏｖｅｒｏｆｎｅｗ　Ｚ　　　　　　ｙｇｙ　　

，［］（），２Ａ．Ｍ．Ｂ２Ｊ．ｌｉｃｒｏｂｉｏｌｉｏｔｅｃｈｎｏｌ００７，７５２６７７７．２－ｐｐ［］６ｉｌｌｉａｍｓＲＢ，ＨｅｎｒｉｋｓｏｎＪＣ，ＨｏｏｖｅｒＡ　Ｒ，ｅｔａｌ．Ｅｉｅｎｅｔ－　Ｗ　　　　　　ｐｇ

］ｉＯｃｒｅｍｏｄｅｌｉｎｏｆｔｈｅｆｕｎａｌｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａｂｏｌｏｍｅ［Ｊ．ｒ　　　　ｇｇｙｇ　　（）：Ｃ１２ｈｅｍ，００８，６１１８９５８９７．１Ｂｉｏｍｏｌ　－［］７ｏｋＪＷ，ＮｏｏｒｄｅｒｍｅｅｒＤ，ＫａｌｅＳＰ，ｅｔａｌ．Ｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａ－　Ｂ　　　　　　ｙ　

］Ｊ．ｂＡｎＭｏｌｉｃｅｎｅｃｌｕｓｔｅｒｓｉｌｅｎｃｉｎｉｎｓｅｒｉｌｌｕｓｉｄｕｌａｎｓ［ｏ－　　　　　ｇｇｐｇ　（）：２ｌＭ１ｅｃｕｌａｒ　ｉｃｒｏｂｉｏｌｏ００６，６１６６３６６４５．１－ｇｙ，

［］８ｈｗａｂＥＫ，ＢｏｋＪＷ，ＴｒｉｂｕｓＭ，ｅｔａｌ．Ｈｉｓｔｏｎｅｄｅａｃｅｔｌａｓｅ　Ｓ　　　　　　　ｙ

］ＡＥＪ．ａｃｔｉｖｉｔｒｅｕｌａｔｅｓｃｈｅｍｉｃａｌｄｉｖｅｒｓｉｔｉｎｓｅｒｉｌｌｕｓ［ｕ－　　　ｙｇｙｐｇ　　（）：２ｋＣ１ａｒｏｔｉｃｅｌｌ，００７，６９６５６６６４．１　－ｙ［９］　ＴｒｏｅｒＰ，ＢｒａｎｄｔｎｅｒＥ　Ｍ，ＢｒｏｓｃｈＧ，ｅｔａｌ．Ｈｉｓｔｏｎｅ　　　　ｊ

：，］ｕ－ｄｅａｃｅｔｌａｓｅｓｉｎｆｕｎｉｎｏｖｅｌｍｅｍｂｅｒｓｎｅｗｆａｃｔｓ［Ｊ．Ｎ　　　　ｙｇ（）：ｌｅｉｃｃｉｄｓｅｓ，００３，３１１４９７１９８１．３ｃＡＲ３２　　－［］１０ｒｏｓｃｈＧ，ＬｏｉｄｌＰ，ＧｒａｅｓｓｌｅＳ．Ｈｉｓｔｏｎｅｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓａｎｄ　Ｂ　　　　　

：ａｃｈｒｏｍａｔｉｎｄｎａｍｉｃｓｆｏｃｕｓｏｎｆｌａｍｅｎｔｏｕｓｆｕｎｉ［Ｊ］．　　　　　ｙｇ（）：ＦＭＲ４２ＥＭＳ　ｉｃｒｏｂｉｏｌｅｖ，００８，３２３０９３９．４　－［］，１１ｒｅｗａｌＳＩＳ，ＢｏｎａｄｕｃｅＭＪＫｌａｒＡＪＳ．Ｈｉｓｔｏｎｅｄｅａｃｅｔ－　Ｇ　　　　　　　　　ｙ

ｌａｓｅｈｏｍｏｌｏｓｒｅｕｌａｔｅｅｉｅｎｅｔｉｃｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅｏｆｔｒａｎｓｃｒｉ－　　　　　　ｇｇｐｇｐｉｏｎａｌｓｉｌｅｎｃｉｎａｎｄｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓｅｒｅａｔｉｏｎｉｎｆｉｓｓｉｏｎｅａｓｔｔ　　　　　　ｇｇｇｙ　（）［］：，ｅｎｅｔｉｃｓ９９８，１５０２６３７６．Ｊ．５Ｇ５１－［］１２ｉｅｌＭ，ＷａｓｃｈｏｌｏｗｓｋｉＶ，ＧｉａｎｎｉｓＡ．Ｅｉｅｎｅｔｉｃｓａｎｅｉ　Ｂ　　　－－　ｐｇｐ

：ｈｃｅｎｔｅｒｏｆｅｎｅｒｅｕｌａｔｉｏｎｉｓｔｏｎｅｓａｎｄｈｉｓｔｏｎｅｏｄｉｆｉｎ－ｍ　　　　　ｇｇｙｇ］：２ＡＣＩＥｅｎｚｍｅｓ［Ｊ．ｎｅｗ　ｈｅｍ　ｎｔｄ，００５，４４（２１）１８６３　－ｙｇ３２１６．

［］１３ｅｎｚｍｅｓｏｌｅＰＡ．Ｃｈｅｍｉｃａｌｒｏｂｅｓｆｏｒｈｉｓｔｏｎｅｏｄｉｆｉｎ－ｍ　Ｃ　　　　　ｙｐｙｇ　

［］（）：Ｊ．ａｔｈｅｍ　ｉｏｌ，００８，４１０９０９７．５２ＮＣＢ５　－［１４］ｌｏｏｄ，ｉｎａｌＲ，ＧｉｎｄｅｒＧＤ．ＤＮＡ　Ｍｅｔｈｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂ　Ｓ　　　ｇｙ

（）：９９９，９３１２０５９０７０．４１４－［］１５ｈｏｕＹ，ＣａｍｂａｒｅｒｉＥＢ，ＫｉｎｓｅＪＡ．ＤＮＡ　ｍｅｔｈｌａｔｉｏｎｉｎ　　　Ｚ　　　－ｙｙ　

ｈｉｂｉｔｓｅｘｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｏｓｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅＮｅｕｒｏｓｏｒａＴａｄ　　　　　　　ｐｐｐ］：ＧＧ２ｒｅｔｒｏｔｒａｎｓｏｓｏｎ［Ｊ．Ｍｏｌｅｎｅｔｅｎｏｍｉｃｓ，００１，２６５（４）　　ｐ７４８５４．７－［］１６ａｋａｈａｓｈｉＪＡ，ＴｅｌｅｓＡＰＣ．ＢｒａｃａｒｅｎｓｅＡ　ＡＰ，ｅｔａｌ．　Ｔ　　　　　　　　

Ｃｌａｓｓｉｃａｌａｎｄｅｉｅｎｅｔｉｃａｒｏａｃｈｅｓｔｏｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｄｉｖｅｒｓｉｆｉ　　　　　　－ｐｇｐｐ］ａｔｉｏｎｉｎｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓｆｕｎｉ［Ｊ．ｈｔｏｃｈｅｍ　ｅｖ，０１３，１２ｃＰＲ２　　　ｇｙ（）：４７７３８９．７－［］１７ｔｏｉｃｈｅｗｉｃｚＲ　Ｈ．Ｅｉｅｎｏｍｅｍａｎｉｕｌａｔｉｏｎａｓａａｔｈｗａ　Ｃ　　　　　ｐｇｐｐｙ　

］Ｎｎｅｗｎａｔｕｒａｌｒｏｄｕｃｔｓｃａｆｆｏｌｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｎｅｎｅｒｓ［Ｊ．ａｔ　　　　　　ｐｇ（）：Ｒ２２Ｐｒｏｄ　ｅ０１０，２７１１２．１－ｐ，

［］，１８ｏｍａｒｌｅｒＲＬ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｅｌｌｕｌａｒａｎｄａｎｉｍａｌｈａｒｍａｃｏｌ－　Ｍ　　　　　ｐｐ

］ｚａ′ｅｏｘｃｔｉｄｉｎｅ［Ｊ．ｈａｒｍａｃｏｌｈｅｒ９８５，ｏａ２ｄＰＴ１ｏｆ５－－－　　　ｙｙｇｙ　（）：３０３８７９９．２２－［］１９ｉａｃｏｕｒａｓＡＳ，ＡｎｄｅｒｓｏｎＥＰ．Ｕｒｉｄｉｎｅｃｔｉｄｉｎｅｋｉｎａｓｅ．　Ｌ　　　　－　ｙ

ａＩＶ．Ｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｔｈｅｃｏｍｅｔｉｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎ５ｚａｃｔｉｄｉｎｅａｎｄ－　　　　　　ｐｙ］Ｐ１ｔｈｅｔｗｏｎａｔｕｒａｌｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ［Ｊ．Ｍｏｌｈａｒｍａｃｏｌ９７９，１５　　　　　（）：３２３１４０．３－［］２０ｈｅｎＪＣ，ＭａｔｓｅｎＣＢ，ＧｏｎｚａｌｅｓＦＡ，ｅｔａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆ　Ｃ　　　　　　　ｇ　

ＤＮＡ　Ｍｅｔｈｌａｔｉｏｎａｎｄｒｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｓｉｌｅｎｃｅｄｅｎｅｓｂｚｅ　　　　　　－ｙｇｙ　］（）：ｕｌａｒｉｎｅ［Ｊ．ａｔｌａｎｃｅｒｎｓｔ，００３，９５５９９０９．３ｂＪ　ＮＣＩ４２　　－［］２１ｓａｉＴ，ＹａｍａｍｏｔｏＴ，ＯｓｈｉｍａＹ．Ｈｉｓｔｏｎｅｄｅａｃｅｔｌａｓｅｉｎ　Ａ　　　　　－ｙ

ＢＣｎａｔｕｒａｌｒｏｄｕｃｔｓｂｅｎｏｍｅｍｉｎｉｎＪ］．Ｃｈｅｍ　ｉｏｈｅｍ，　　　　ｐｙｇｇ［　

（）：２００９，１０４２５３３．６６－［］４ｈｉａｎＹ　Ｍ，ＣｈａｎＳＬ，ＯａｋｌｅＢＲ，ｅｔａｌ．Ｒｅｃｅｎｔａｄ　Ｃ　　　　－ｇｇｙ　　　

ｖａｎｃｅｓｉｎａｗａｋｅｎｉｎｓｉｌｅｎｔｂｉｏｓｎｔｈｅｔｉｃｅｎｅｃｌｕｓｔｅｒｓａｎｄ　　　　　　ｇｙｇ　ｌｉｎｋｉｎｏｒｈａｎｃｌｕｓｔｅｒｓｔｏｎａｔｕｒａｌｒｏｄｕｃｔｓｉｎｍｉｃｒｏｏｒａｎ－　　　　　　ｇｐｐｇ　［］（）：ｓｍｓＪ．ｕｒｒｎｈｅｍ　ｉｏｌ，０１１，１５１３７４７．１２ｉＣＯｉＣＢ１　　－ｐ［］５ｒｏｓｓＨ．Ｓｔｒａｔｅｉｅｓｔｏｕｎｒａｖｅｌｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｏｒｈａｎｂｉｏ　Ｇ　　　　　　　　－ｇｐ

：ｒｓｎｔｈｅｓｉｓａｔｈｗａｓｅｃｅｎｔｅｘａｍｌｅｓａｎｄｆｕｔｕｒｅｒｏｓｅｃｔｓ　　　　　ｙｐｙｐｐｐ

５期张伟，等：化学表观遗传修饰方法在真菌次级代谢产物研究中的应用

ｈｉｂｉｔｏｒｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅｎｏｖｅｌｒｅｎｌａｔｅｄ　　　　　　　ｐｐｙ，Ｔｔｒｔｏｈａｎａｎａｌｏｓｉｎｔｈｅｅｎｔｏｍｏａｔｈｏｅｎｉｃｆｕｎｕｓｏｒ－　　　　　ｙｐｐｇｐｇｇ

（）：１２６０２６６．７１－１９　

［］，３２ｈｅｎＨＪＡｗａｋａｗａＴ，ＳｕｎＪＹ，ｅｔａｌ．Ｅｉｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉ－　Ｃ　　　　　　　ｐｇ

ｅｉｒｎｄｕｃｅｄｂｉｏｓｎｔｈｅｓｉｓｏｆｎｏｖｅｌｆｕｓａｒｉｃａｃｉｄｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｉｎ－　　　　　　　ｙ

ｒｌＬＪ］．Ｔｕｂｉｅｌｌａｕｔｅｏｒｏｓｔｒａｔａ［ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　ｅｔｔ，２０１１，５２　

（）：７０４２０４５．５２７－［２２］ｓａｉＴ，ＬｕｏＤ，ＯｂａｒａＹ，ｅｔａｌ．Ｄｉｈｄｒｏｂｅｎｚｏｆｕｒａｎｓａｓ　Ａ　　　　　ｙ

ＤｓＬ［Ｊ］．Ｎｅｎｄｏｈｔｉｃｆｕｎｉｆｒｏｍ　ａｔｕｒａｔｒａｍｏｎｉｕｍ　ａｔ　　　ｐｙｇ

（）：２Ｂ２Ｐｒｏｄ　ｉｏｒｏｓｅｃｔ，０１３，３１０３．２－ｐｐ［］３３ａｎＸＬ，ＡｗａｋａｗａＴ，ＷａｋｉｍｏｔｏＴ，ｅｔａｌ．Ｉｎｄｕｃｅｄｂｉｏ－　Ｙ　　　　　ｇ　

ｓｎｔｈｅｓｅｓｏｆａｎｏｖｅｌｂｕｔｒｏｈｅｎｏｎｅａｎｄｔｗｏａｒｏｍａｔｉｃ　　　　　　　ｙｙｐ

ａａｏｒｄｃｅｓｎｎｕｌｌａｔａ，ｎｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｒｅｃｅｔｏｒｌｉａｎｄｓｆｒｏｍＣ　　　　ｐｇｙｐｅｎｔｏｍｏａｔｈｏｅｎｉｃｆｕｎｕｓｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｉｎｔｈｅｒｅｓｅｎｃｅｏｆａｎ　　　　　　　ｐｇｇｐ］：Ｌ２ＨＤＡＣｉｎｈｉｂｉｔｏｒ［Ｊ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　ｅｔｔ，０１２，５３（１７）　２２３９２４３．２－［２３］ｓａｉＴ，ＹａｍａｍｏｔｏＴ，ＯｓｈｉｍａＹ．Ａｒｏｍａｔｉｃｏｌｋｅｔｉｄｅ　Ａ　　　　ｐｙ

Ｓｎｔａｏｎｏｓｏｒａｏｄｏｒｕｍｏｌｋｅｔｉｄｅｓｉｎｔｈｅｌａｎｔａｔｈｏｅｎ　　　　　　ｐｙｐｐｇｇｐ［］（）：ＮＰＢ１Ｊ．２ａｔｒｏｄ　ｉｏｒｏｓｅｃｔ，０１３，３４４１４４．１　－ｐｐ［］３４ｉａｏＦＰ，ＬｉａｎＸＲ，ＬｉｕＸ　Ｈ，ｅｔａｌ．ＡｓｅｗｅｎｔｉｎｓＡ－Ｃ，　Ｍ　　　　　　ｇｐ　

ｎｏｒｄｉｔｅｒｅｎｅｓｆｒｏｍａｃｒｔｉｃａｔｈｗａｉｎａｎａｌｉｃｏｌｏｕｓｓｔｒａｉｎ　　　　　　　ｐｙｐｐｙｇ　（）］：ｓｅｒｉｌｌｕｓｅｎｔｉｉ［ａｔｒｏｄ，０１４，７７２２９Ｊ．２４ＡｗＪ　ＮＰｏｆ　　－　ｐｇ４３２．

［］３５ａｎＸ，ＳｅｎａＦｉｌｈｏＪＧ，ＨｏｏｖｅｒＡ　Ｒ，ｅｔａｌ．Ｃｈｅｍｉｃａｌｅ－　Ｗ　　　　　　ｇｐ　

ｎｅｔｉｃｓａｌｔｅｒｓｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｃｏｍｏｓｉｔｉｏｎｏｆｉｅ　　　　　ｙｐｇ　ｆｓｄＰｕｔｔａｔｅｅｘｃｒｅｔｅｄｂａｎＡｔｌａｎｔｉｃｏｒｅｓｔｏｉｌｅｒｉｖｅｄｅｎｉｃｉｌ－－－－　　　　ｇｙ　］：ｌｃＪ　ＮＰＪ．２ｉｕｍ　ｉｔｒｅｏｎｉｒｕｍ［ａｔｒｏｄ，０１０，７３（５）４２９　－ｇ４８．９

［］　Ａ３６ｓａｉＴ，ＹａｍａｍｏｔｏＴ，ＣｈｕｎＹ　Ｍ，ｅｔａｌ．Ａｒｏｍａｔｉｃ　　　ｇ　

，ｏｌｋｅｔｉｄｅｌｃｏｓｉｄｅｓｆｒｏｍａｎｅｎｔｏｍｏａｔｈｏｅｎｉｃｆｕｎｕｓ　　　　　ｐｙｇｙｐｇｇ

Ｃｉａｏｒｄｃｅｓｎｄｉｏｔｉｃａ，ｎｅｎｔｏｍｏａｔｈｏｅｎｉｃｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ　　　　ｐｇｐｙｐｇ，ｆｕｎｕｓｉｎｄｕｃｅｄｂｅｘｏｓｕｒｅｔｏａｈｉｓｔｏｎｅｄｅａｃｅｔｌａｓｅｉｎｈｉｂ－　　　　　　ｇｙｐｙ　］（）：ｉＯＬ２２ｔｏｒ［Ｊ．ｒｅｔｔ，０１２，１４８００６００９．２－ｇ　

［］２４ｓａｉＴ，ＭｏｒｉｔａＳ，ＳｈｉｒａｔａＮ，ｅｔａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｄｉｖｅｒｓｉｔｏｆ　Ａ　　　　　ｙ　

ｌｋｅｔｉｄｅｓｒｏｄｕｃｅｄｂｈａｅｔｏｍｉｕｍ　ｏｌｌｉｉｌｉｕｍＣｍｏｎｅｗＣ　　　ｙｐｙｐｐ３－１　ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｉｎｔｈｅｒｅｓｅｎｃｅｏｆａＮＡＤ＋？ｄｅｅｎｄｅｎｔｈｉｓｔｏｎｅ　　　　　　　ｐｐ］：２ＯＬｄｅａｃｅｔｌａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ［Ｊ．ｒｅｔｔ，０１２，１４（２１）４５６５－　ｙｇ　４５９．５

［］２５ｓａｉＴ，ＯｔｓｕｋｉＳ，ＳａｋｕｒａｉＨ，ｅｔａｌ．Ｂｅｎｚｏｈｅｎｏｎｅｓｆｒｏｍ　Ａ　　　　　ｐ

，Ｇｃａｎｅｎｄｏｈｔｉｃｆｕｎｕｓｒａｈｉｏｓｉｓｈｌｏｒｏｃｅｈａｌａ，ｆｒｏｍ　　　ｐｙｇｐｐｐａｅｏｎｉａａｃｔｉｌｏｒａｕｌｔｉｖａｔｅｄｉｎｔｈｅｒｅｓｅｎｃｅｏｆａｎＮＡＤ＋－Ｐｌｃ　　　　　　　　ｐｆ］：２ｄＯＬｅｅｎｄｅｎｔＨＤＡＣｉｎｈｉｂｉｔｏｒ［Ｊ．ｒｅｔｔ，０１３，１５（８）　　ｐｇ　２０５８０６１．２－［］２６ｄｉｓａｉＴ，ＹａｍａｍｏｔｏＴ，ＳｈｉｒａｔａＮ，ｅｔａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｌ－　Ａ　　　　ｙ　

ｖｃｈｅｍｉｃａｌｌｍｅｄｉｅｒｓｅｃｈａｅｔｏｈｅｎｏｌｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｉｎｄｕｃｅｄｂ－　　　　ｙｐｐｙ　　］ａｔｅｄｅｉｅｎｅｔｉｃｍａｎｉｕｌａｔｉｏｎｏｆｆｕｎａｌｅｎｅｅｘｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ．　　　　　　ｐｇｐｇｇｐ（）：ｒｅｔｔ，０１３，１５１３３４６３４９．３２ＯＬ３－ｇ　

［］２７ｓａｉＴ，ＴａｎｉｕｃｈｉＴ，ＹａｍａｍｏｔｏＴ，ｅｔａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆ　Ａ　　　　　ｇ

ｓｉｒｏｉｎｄｉｃｕｍｉｄｅｓＡａｎｄＢ，ｕｎｒｅｃｅｄｅｎｔｅｄｃａｒｂｏｎｓｋｅｌｅｔａｌｓ　　　　　ｐｐ，ｓｉｒｏｌａｃｔｏｎｅｓａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｂｓｏｌｕｔｅｃｏｎｆｉｕｒａ－　　　　　ｐｇ］ｔｖｉｂｒａｔｉｏｎａｌｃｉｒｃｕｌａｒｄｉｃｈｒｏｉｓｍｅｘｃｉｔｏｎａｒｏａｃｈ［Ｊ．ｉｏｎｂ　　　　　ｐｐｙ　（）：２ＯＬ４ｒｅｔｔ，０１３，１５１７３２０３２３．４－ｇ　

［］２８ｅｎｒｉｋｓｏｎＪＣ，ＨｏｏｖｅｒＡ　Ｒ，ＭａｔｔｈｅｗＪｏｎｅｒＰ，ｅｔａｌ．Ａ　Ｈ　　　　　　ｙ

ｏｒｄｃｅｓｎｄｉｏｔｉｃａ［ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　ｅｔｔ，２０１２，５３Ｊ］．ＴＣｉＬ　ｙｐｇ（）：２３７７８０．２－［］３７Ｙ　Ｍ，ＷｅｉＣＫ，ＣｈｕａｎＤ　Ｗ，ｅｔａｌ．Ａｎｅｉｅｎｅｔｉｃｈｕｎ　　　　　Ｃｐｇｇｇ　　

ｉａｂｅｔｉｃａｎｄａｎｔｉｄｍｏｄｉｆｉｅｒｅｎｈａｎｃｅｓｔｈｅｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ　　－－　　　　　ｐｉＡｓｄｓｅｓｕｉｔｅｒｅｎｏｉｄｓｆｒｏｍ　ｎｆｌａｍｍａｔｏｒｓｅｒｉｌｌｕｓｏｗｉｉ　　ｑｐｙｙｐｇ　［］（）：ＢＭＣ３Ｊ．２ｉｏｏｒｅｄ　ｈｅｍ，０１３，２１１３８６６８７２．３－ｇ　

［］Ｌ，ＲｕａｎＸＬ．Ｅｉｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉｅｒｓａｌｔｅｒ３８ａｎＸＬ，Ｈｕａｎ　　　　　　Ｙｐｇｇｇ　　

ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｃｏｍｏｓｉｔｉｏｎｏｆａｌａｎｔｅｎｄｏｈｔｉｃｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒ　　　　　　ｐｐｐｙｙ　，ｆｕｎｕｓＰｅｓｔａｌｏｔｉｏｓｉｓｃｒａｓｓｉｕｓｃｕｌａｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅｌｅａｖｅｓ　　　　　ｇｐ］ｒａａｒｉａｈｉｌｏｅｎｓｉｓ［ｓｉａ　ａｔｒｏｄ　ｅｓ，０１４，１６ＦｃＪ　ＡＮＰＲＪ．２ｏｆ　　　ｇ（）：４４１２１７．４－［］３９Ｙ　Ｍ，ＳａｋｕｒａｉＨ，ｅｔａｌ．ＨｉｈｌｏｘｉｄｉｚｅｄｅｒｓａｉＴ，Ｃｈｕｎ－　　　　Ａ　ｇｙｇ　　

ｓｔｅｒｏｌｓａｎｄｉｓａｒｉｏｔｉｎａｎａｌｏｓｆｒｏｍａｎｅｎｔｏｍｏａｔｈｏｅｎｉｃｏ　　　　　　ｇｐｇｇ

，ｏｃＧｆｕｎｕｓｉｂｅｌｌｕｌａｒｍｏｓａｎａ，ｕｌｔｉｖａｔｅｄｉｎｔｈｅｒｅｓｅｎｃｅｏｆ　　　　　ｇｐｆａｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｔｅｉｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉｎｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，２０１２，６８　ｇｐｇｙｇ　：（）８１７８２３．５５２９－［］，４０Ｙ　Ｍ，ＳａｋｕｒａｉＨ，ｅｔａｌ．ＴｅｎｕｉｒｏｎｅａｎｏｓａｉＴ，Ｃｈｕｎ－　Ａ　　　　ｇｐｙ　

，ｖｅｌｓｋｅｌｅｔａｌｏｌｋｅｔｉｄｅｆｒｏｍｔｈｅｅｎｔｏｍｏａｔｈｏｅｎｉｃｆｕｎｕｓ　　　　　　ｐｙｐｇｇ

ｉｓｂｎｉｔｕｉｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｅｉｅｎｅｔｉｃｓａｒｏａｃｈｆｏｒｅｎｉｎｅｅｒｉｎ　　－　　　　　ｐｇｐｐｇｇ　

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