蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速测定

作者：洪明祥

来源：《农业开发与装备》 2016年第4期

洪明祥

（沈阳市农业监测总站，辽宁沈阳 110034）

摘要：介绍了蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定技术，根据有机磷及氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶活性，从而导致加入底物后颜色发生不同程度的变化，读出吸光度变化值，进而计算出抑制率的方法来判断果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留情况。对快速测定技术的优点、缺点以及需要注意的问题作了系统阐述。

关键词：蔬菜；有机磷及氨基甲酸酯类农药；快速测定技术

随着人民生活水平的提高、健康意识的增强，蔬菜的质量安全问题已成为社会各界普遍关注的大事。因其涉及千家万户，关系国计民生，各级政府对蔬菜生产与流通领域中的监管措施也在不断强化。传统的检测技术如气相色谱仪、液相色谱仪等大型仪器设备虽具备灵敏度高、检测数据准确的优势，但是由于其检测时间长、成本高、对检测人员专业性要求高等不利因素而不能对蔬菜销售中进行有效的监督管理。因此，用时少、成本低，易操作的快速测定方法在这种历史背景下有了广阔的发展空间。

1 实验原理及方法

1.1 实验原理

根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理，用在对农药残留的检测中。如果蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量较低，酶的活性就不被抑制，反之，如果蔬菜的提取液中含有一定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药，酶的活性就被抑制，再用农药残留快速检测仪测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，便可判断出蔬菜中含有机磷或氨基甲酸类酯农药的残留情况。

1.2 实验设备

RP—410农药残留快速检测仪、电子天平（精确到0.1g）、台式培养箱。

1.3 实验试剂

pH8磷酸缓冲液、丁酰胆碱酯酶、底物（碘化硫代丁酰胆碱）、显色剂（二硫代二硝基苯甲酸），酶、底物及显色剂均用缓冲液溶解。

1.4 实验方法

样品处理：选取有代表性的样品，擦去泥土，并剪成1cm见方的小碎片。称取2g（非叶菜类称取4g），加入20ml缓冲液，震荡1～2min，静置3～5min，于小试管内加入50μl酶，3ml样本提取液，50μl显色剂，于37～38℃下的恒温培养箱中放置15min后再分别加入50ul

底物，摇匀后立即倒入比色皿中上机测定3min，根据吸光度值计算出△A或根据直接显示的抑制率即可得出是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药。

1.5 结果判定

检测结果按以下公式计算：

其中，△Ac为对照组3min后与3min前吸光度之差；△As为样品3min后与3min前吸光度之差。

抑制率≥70%时，蔬菜中含有某种或某几种有机磷或氨基甲酸酯类农药残毒，此时样品要做3次以上重复检测，且重现性应大于80%。

2 实验注意事项

1）空白对照实验。初始吸光度值应在0.1～0.3之间，3min后应在0.6～0.9之间，表明显色剂、底物的有效性和可用性；△A的值应在0.3～0.8之间，说明酶具有良好的活性，可以用于测定。

2）质量控制。将60μl浓度为5mg/L的敌敌畏标准溶液加至3ml缓冲液中，同样方法测得的抑制率应在97%～103%，说明实验设备、试剂与条件良好，可以检测。

3）加底物和上机的过程要尽量快速，保证△A值的准确。

4）样品放置时间要与空白样品严格保持一致。

3 快速测定方法的优缺点

3.1 优点

1）快速：样本无需净化，检测全过程只需30min。

2）涵盖范围广：可以同时检测样品中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留，无需单一农药标准品。

3）简便：实验操作简单，容易掌握。

4）经济：该技术对仪器设备、实验条件及所用试剂的要求均不高，且成本低廉。

3.2 缺点

1）酶试剂易失去活性，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好。

2）存在检测盲区，只能检测有机磷及氨基甲酸酯类农药，对有机氯及菊酯类等其他种类农药不能进行检测。

3）检出时，不能确认为何种农药残留。

4）方法的检出限相对较高，对甲基对硫磷、乐果、毒死蜱、二嗪磷等农药不太灵敏，检出浓度均在10mg/kg以上。

5）不适宜检测葱蒜、韭菜，香菜等易产生假阳性的农产品。

尽管快速测定方法还存在着不尽如人意的缺点，但是其在保障农产品安全过程中仍是功不可没，起着不可取代的作用。快速测定方法与大型仪器设备检测相结合，在最大程度上保证了百姓的餐桌安全。多年来，沈阳市农业监测总站不断强化对上市蔬菜、水果等农产品质量的检测力度，对全市的各大超市、蔬菜批发市场、农贸市场和8个县区的蔬菜生产基地的蔬菜农药残留情况，定期开展抽样检测，为有效的防止“毒菜”进行市场，保障百姓的菜篮子安全做出了重大的贡献。

参考文献

[1] 王林，王晶，张莹，等.蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测方法研究[A].新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C].2002：39-41.

[2] 宋茹，纪淑娟，李晶，等.蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留酶片快速检测法的评价[J].食品研究与开发，2004，25（2）：53-53.