AMAMFSAc18019 牛奶 酪蛋白 过滤法
AM-AM-FS-Ac-18019
牛奶中的酪蛋白
1.试剂
吸取250ml 1N HOAc放入1L容量瓶中。加125ml不含CO2的1N NaOH，用不含CO2的水稀释到体积，并充分混匀。
2.试验过程
(当牛奶是新鲜的或近似新鲜时，进行测定。如果延误超过24h，应往牛奶中加HCHO (1:2500)使其混合，冷却)
2.1.方法
在40—42℃把10g样品放入有90ml H2O的烧杯中，立即加入1.5ml HOAc(1+9)。搅拌并放置3—5min。倾注在酸洗过的滤纸上，用冷水倾注法洗涤2或3次，把沉淀移到滤纸上。在滤纸上洗1或2次 (滤液应是澄清的或接近澄清)。如果第1次的滤液不清，再过滤最后洗涤沉淀。保留滤液进行18-20的白蛋白测定。按18-15（将5g样品放入克氏消化瓶中。加0.7gHgO或0.65g金属Hg，15gK2SO4粉末或无水Na2SO4，和25ml H2SO4。如果所用样品超过2.2g，则每g样品增加10ml H2SO4。将瓶子倾斜放置并小心加热直到停止起泡(如果必要，加入少量石蜡以减少泡沫);冒泡沸腾直到溶液变清;然后再延长30min(对含有机物的样品为2h)。冷却，加约200mlH2O，冷却低于25℃，加25ml硫化物或硫代硫酸盐溶液，混合到Hg沉淀。加少量Zn粒防止暴沸，倾斜瓶子，加入不搅动的NaOH层(对于所用的每10ml H2SO4或与此相当的稀H2SO4，加15g固体NaOH或足够的溶液使其成为强碱性)(硫代硫酸盐或硫化物溶液可在加入瓶中之前与NaOH混合)。立即把瓶子与冷凝器的蒸馏球管相连接，并使冷凝器顶部浸入接收器中的标准酸和5—7滴指示剂中，摇动瓶子充分混匀;然后加热直到全部NH3被蒸发(≥150ml蒸馏液)。取下接收器，冲洗冷凝器顶部并用NaOH标准溶液滴定蒸馏液中过量的标准酸。试剂的空白校正。
%N=[(标准酸毫升×酸当量浓度)－(标准NaOH毫升×NaOH当量浓度)]×1.4007/g样品
%N×6.38=蛋白质%）测定洗过的沉淀和纸里的N，用6.38乘结果可得到相当酪蛋白的量。
为保存牛奶样品，在搅拌下滴加HOAc(1+9)，连续加到沉淀上的液体变清或非常接近于澄清。
2.2.测定
移取20ml样品放入100ml容量瓶。加50ml试剂，混合，用水稀释到体积，摇匀。把瓶子放在50—60℃水中(不得超过60℃)15min。冷却到室温，加0.5g C盐分析助滤剂，充分摇动，用适当的折叠滤纸过滤清澈，在过滤时避免蒸发。在50ml清滤液中测定N，x，并测定10ml牛奶样品的总N，y。(y－x)×6.38=10ml牛奶中的酪蛋白。报告为酪蛋白克数/100ml牛奶，或用牛奶的密度除g/100ml，以重量百分含量报结果。
3.来源
AOAC 官方方法927.03（第17版）